1/85. Caracterización molecular de dos mutaciones en la alfa de Ib de la glicoproteína de la plaqueta (GP) en dos familias finlandesas del síndrome de Bernard-Soulier. El síndrome de Bernard-Soulier (BSS) es un desorden y un macrothrombocytopenia hereditarios raros de la sangría que es causado por un defecto en la glicoproteína Ib/IX/V (complejo del GP Ib/IX/V), el receptor para el factor de von willebrand y trombina de la plaqueta. Aquí divulgamos la base molecular de la forma clásica de BSS en dos pacientes finlandeses sin relación, ambos con de siempre una historia de la sangría severa. El flujo cytometry e immunoblotting no demostró ninguna expresión de la alfa del GP Ib/IX, del GP Ib, de GP Ib beta o del GP IX (menos el de 10%) en el patients' plaquetas. Ninguna expresión del GP V (< el 10%) fueron observados en el propositus 1, pero una cantidad residual fue encontrada en el propositus 2 (el 24%). La DNA que ordenaba análisis reveló que el propositus 1 era heterozigótico compuesto para una canceladura de los dos-base-pares en Tyr505 (TAT) y una mutación de punto Leu129 (adaptador de canal a canal) favorable (CCC) en el gene de la alfa del GP Ib. El Propositus 2 era homocigótico para la canceladura Tyr505 (TAT). Los nueve parientes que eran heterozigóticos para cualquiera de las mutaciones también tenían niveles bajos de la alfa del GP Ib (74-90%). Por lo tanto, los pacientes de Bernard-Soulier homocigóticos o heterozigóticos compuestos para Tyr505 (TAT) son seriamente afectados. Interesante, ambas mutaciones se han encontrado independientemente en tres otras familias en informes anteriores, sugiriendo su edad antigua o ' mutacional; spot' caliente;. ( info) |
2/85. La interacción crítica de la glicoproteína (GP) IBbeta con la causa genética de GPIX-a del síndrome de Bernard-Soulier. El síndrome de Bernard-Soulier es un desorden infrecuente de la sangría causado por un defecto cuantitativo o cualitativo en el complejo de la glicoproteína de la plaqueta (GP) Ib/IX. El complejo se compone de cuatro subunidades, GPIbalpha, GPIbbeta, GPIX, y GPV. Aquí describimos la base molecular de una variante nueva del síndrome de Bernard-Soulier en un paciente en quien GPIbalpha y GPIX eran imperceptibles en la superficie de la plaqueta. El análisis de la secuencia de la DNA demostró la secuencia normal para GPIbalpha, GPIX, y GPV. El gene de GPIbbeta se ha trazado a la región 22q11.2 de cromosoma 22 que fue suprimido a partir de un cromosoma de este paciente. Había una sola canceladura del nucleótido dentro del codón para el Ala 80 en GPIbbeta dentro del otro alelo. Esta mutación causa un cambio de translación del marco que codifique para 86 aminoácidos alterados y prediga los aminoácidos prematuros de una parada 15 brevemente de la longitud del salvaje-tipo proteína. El coexpression transitorio del mutante GPIbbeta en las células 293T con el salvaje-tipo GPIbalpha y GPIX dio lugar a la expresión superficial de GPIbalpha, pero a la ausencia de GPIX. Por otra parte, cuando un plásmido que codificaba el salvaje-tipo GPIbbeta transfected transitorio en las células chinas del ovario del hámster que expresaban estable GPalpha, que conservan la capacidad a los reexpress GPIX, había un aumento significativo en la expresión superficial de GPIX. En cambio, cuando el mutante GPIbbeta transfected transitorio en estas células, GPIX no reexpressed en la superficie del plasma. Así, una canceladura de una copia de GPIbbeta y una sola canceladura del nucleótido en el codón para el Ala 80 dentro del alelo restante de GPIbbeta causa el fenotipo de Bernard-Soulier con una interacción de GPIbbeta con GPIX dando por resultado la ausencia de GPIbalpha en la membrana de plasma. La interacción de GPIbbeta con GPIX es esencial para la expresión funcional de GPIbalpha. ( info) |
3/85. heterocigoto compuesto (del 554-589, transición de C515-T) en el gene alfa de Ib de la glicoproteína de la plaqueta en un paciente con una tendencia severa de la sangría. Las plaquetas gigantes en el borrón de transferencia de la sangre, la aglutinación in vitro ausente de la plaqueta en respuesta a ristocetin, y la agregación normal, la secreción del ATP y la formación del tromboxano b2 fueron encontradas en un paciente joven con una tendencia de siempre que sangraba. el factor Ristocetin-inducido de von Willebrand que ataba a sus plaquetas era menos de el 10% de normal. El análisis cytometric del flujo con los anticuerpos monoclonales LJ-Ib-1, LJ-Ib-10, y LJ-P3 era constante con último encontrar. El análisis de SDS-PAGE de plaquetas solubilizadas demostró una reducción marcada de la glicoproteína de la plaqueta (GP) Ibalpha. La caracterización genética demostró que el paciente y su padre eran heterozigóticos para una canceladura de 36 nucleótidos (posiciones 554-589) que llevaban a un mutante GPIalpha (canceladura de aminoácidos del residuo 169 a 180 y de un Glu --> Substitución de Lys en el residuo 181). Además, A.C. --> La transición de T en el nucleótido 515 en el otro alelo del gene de GPIbalpha fue encontrada en el paciente y en su madre esa los resultados en la substitución de la alanina para la valina en el codón 156 (tipo Bolzano de Bernard-Soulier). Estas variaciones ocurrieron dentro del VI y de VII las repeticiones leucina-ricas. La variante nueva del síndrome de Bernard-Soulier identificada sugiere más lejos que la integridad de repeticiones leucina-ricas es importante para la función normal del complejo del receptor del GP Ib-IX-V. ( info) |
4/85. Desordenes gigantes de la plaqueta en los niños del African-American diagnosticados como púrpura thrombocytopenic idiopática. Una revisión retrospectiva de la carta de seis niños del African-American con una diagnosis de los macrothrombocytopenias (MTCP) fue realizada para evaluar la exactitud de su diagnosis. Lo que sigue fue diagnosticado en los seis niños con MTCP: Síndrome de Fechtner (dos niños), síndrome de Sebastian (un niño), y MTCP innomado (tres niños). En cinco familias, la púrpura thrombocytopenic idiopática crónica (ITP) fue diagnosticada en el propositus, que dio lugar en la terapia usando los esteroides, inmunoglobulina intravenosa (IVIG), y a un splenectomy del caso. Los síntomas de la sangría eran generalmente suaves. Los seis pacientes tenían trombocitopenia el extenderse a partir del 10 a 125 a x 10 (9)/L con el volumen malo de la plaqueta de 8 a 20 la florida. Los tiempos de la sangría eran anormales en dos de tres pacientes, y la agregación de la plaqueta era anormal en tres de cuatro pacientes probados. La médula aspira fue divulgada como megakaryocytes crecientes en los tres pacientes en quienes el procedimiento fue realizado. La morfología ultraestructural de plaquetas y de leucocitos fue realizada en los seis pacientes que demostraban las plaquetas gigantes en los seis pacientes y las inclusiones del leucocito en tres pacientes. El distinción de MTCP del ITP más común puede ser difícil pero importante en evitar estudios de diagnóstico innecesarios y la terapia potencialmente dañosa asociados a ITP. ( info) |
5/85. Diagnosis Antepartum de la hemorragia intracraneal fetal debido al síndrome maternal de Bernard-Soulier. FONDO: El síndrome de Bernard-Soulier, una carencia de la glicoproteína IB/IX, es un desorden recesivo de un autosoma raro de la sangría caracterizado por la disfunción de la plaqueta. Las mujeres con el síndrome de Bernard-Soulier son en peligro de la inmunización contra la glicoproteína IB/IX, llevando a la trombocitopenia neonatal del isoimmune severo. CASO: Una mujer japonesa de 26 años, mujer embarazada 1, para 0, con el síndrome de Bernard-Soulier presentado en 35 weeks' gestación con los cambios en los patrones fetales del ritmo cardíaco y los resultados ultrasonographic que sugirieron fuertemente hemorragia intracraneal fetal. La gerencia estaba al lado de histerectomia cesariana y de salpingo-ooforectomía bilateral en 36 semanas, pero el recién nacido murió 6 horas después del nacimiento. CONCLUSIÓN: La inmunización maternal a la glicoproteína IB/IX durante embarazo puede causar trombocitopenia fetal severa y la sangría intracraneal masiva. ( info) |
6/85. Encierro vestibular con un silastic obturador--una alternativa a Young' procedimiento de s en diátesis que sangra. La epistaxis es un problema común y difícil a manejar en pacientes con desordenes de la sangría. Presentamos un caso de la epistaxis recurrente en un paciente con el síndrome de Bernard-Soulier (un desorden de la plaqueta) y describimos un método no invasor pero eficaz de cerrar el vestíbulo nasal usando un silastic obturador así previniendo los efectos de sequía de la circulación de aire sobre la mucosa nasal que puede precipitar la epistaxis en pacientes con una diátesis de la sangría. ( info) |
7/85. Cys97--> La mutación de Tyr en el gene de la glicoproteína IX se asoció al síndrome de Bernard-Soulier. El síndrome de Bernard-Soulier (BSS) es un desorden recesivo de un autosoma de la sangría debido a las anormalidades cuantitativas o cualitativas en el complejo de la glicoproteína (GP) Ib/IX/V, el receptor de la plaqueta para el factor de von willebrand. Describimos aquí la base genética del desorden en un paciente con BSS. Análisis cytometric del flujo del patient' las plaquetas de s demostraron un GPIbalpha grandemente reducido y un GPIX totalmente ausente la expresión superficial. El análisis de Immunoblot divulgó GPIbalpha grandemente reducido y cantidades residuales de GPIbbeta y de GPIX en las plaquetas. La DNA que ordenaba análisis reveló al paciente para ser homocigótica para una mutación sin sentido nueva en el gene de GPIX que convierte Cys (TGT) a Tyr (TAT) en el residuo 97. Los estudios transitorios de la transfección confirmaron que el mutante GPIX no fue expresado en las células transfected, demostrando que la mutación era responsable del fenotipo de BSS observado en el paciente. ( info) |
8/85. Síndrome adquirido de Bernard-Soulier: un caso con vasculitis de necrotización y trombosis. Describimos a un paciente con los anticuerpos antinucleares positivos, gammopathy y de alto nivel policlonales de immunocomplexes de circulación, dando por resultado púrpura vascular. Además, el paciente tenía un rato que sangraba levemente prolongado y un defecto aislado de la agregación ristocetin-inducida de la plaqueta (RIPA) en el plasma plaqueta-rica (PRP). El patient' el plasma de s también inhibió RIPA en el normal PRP y en la suspensión normal de la plaqueta. La actividad y la estructura multimeric del factor plasmático de von Willebrand no demostraron ninguna alteración. Podríamos demostrar un autoanticuerpo contra la glicoproteína de la membrana de la plaqueta (GP) Ib, usando un ELISA-tipo análisis. Estos datos sugieren un síndrome adquirido de Bernard-Soulier. Sugerimos que el paciente hizo una vasculitis leukocytoclastic immunocomplex-mediada acompañar por la producción de autoanticuerpos antinucleares así como la presencia de un autoanticuerpo contra el bus de interface de fines generales. El título del anticuerpo anti-Bus de interface de fines generales, sin embargo, era demasiado bajo inducir el plaqueta-tipo significativo tendencia de la sangría, sólo las alteraciones del laboratorio fueron encontradas. Por otra parte, en un estado avanzado de su enfermedad, ella desarrolló una vasculitis de necrotización severa que fue seguida por una trombosis venosa profunda. ( info) |
9/85. La expresión superficial de la alfa del ib de la glicoproteína es dependiente en el ib de la glicoproteína beta: evidencia de una mutación nueva que causa el síndrome de Bernard-Soulier. El síndrome de Bernard-Soulier es un desorden raro de la sangría causado por un defecto cuantitativo o cualitativo en el complejo de Ib-IX-V de la glicoproteína de la plaqueta (GP). El complejo, que sirve como receptor de la plaqueta para el factor de von willebrand, se compone de 4 subunidades: Alfa del bus de interface de fines generales, bus de interface de fines generales beta, GPIX, y GPV. Aquí describimos la base molecular de una forma nueva de síndrome de Bernard-Soulier en un paciente en quien los componentes del complejo Bus de interface de fines generales-IX-v eran imperceptibles en la superficie de la plaqueta. Aunque la proyección de imagen confocal confirmara que la alfa del bus de interface de fines generales no estaba presente en la superficie de la plaqueta, la alfa del bus de interface de fines generales era fácilmente perceptible en el patient' plaquetas de s. Por otra parte, la inmunoprecipitación del plasma con los anticuerpos monoclonales específicos identificó circulando, alfa soluble del bus de interface de fines generales. el análisis de la DNA-secuencia reveló las secuencias normales para la alfa del bus de interface de fines generales y GPIX. Había una substitución de G a de A en la posición 159 del bus de interface de fines generales de la codificación del gene beta, dando por resultado una terminación prematura de la traducción en el aminoácido 21. Los estudios del coexpression transitorio de este mutante, W21stop-GPIb beta, junto con el salvaje-tipo GPIbalpha y GPIX, demostraron una falta de la expresión de GPIX en la superficie de las células de HEK 293T. Los resultados similares fueron obtenidos con las células chinas de la alfa IX del ovario del hámster, una variedad de células estable que expresaba GPIbalpha que conserva la capacidad re-expresa GPIX. Así, encontramos que GPIbbeta afecta a la expresión superficial del complejo Bus de interface de fines generales-IX no pudiendo apoyar la inserción de la alfa del bus de interface de fines generales y de GPIX en la membrana de la plaqueta. (sangre. 2000; 96: 532-539) ( info) |
10/85. Pro74 homocigótico--> La mutación de Arg en el gene de Ibbeta de la glicoproteína de la plaqueta se asoció al síndrome de Bernard-Soulier. El síndrome de Bernard-Soulier (BSS) es un desorden recesivo de un autosoma de la sangría debido a las anormalidades cuantitativas o cualitativas en el complejo de la glicoproteína (GP) Ib/IX/V, el receptor de la plaqueta para el factor de von willebrand. Este complejo se compone de cuatro subunidades, GPIbalpha, GPIbbeta, GPIX y GPV. Describimos aquí la base genética del desorden en un paciente con BSS. Análisis cytometric del flujo del patient' las plaquetas de s demostraron GPIbalpha y GPIX grandemente reducidos la expresión superficial. El análisis de Immunoblot divulgó la ausencia de GPIbalpha, de GPIbbeta y de GPIX en las plaquetas. La DNA que ordenaba análisis reveló una mutación sin sentido nueva en el gene de GPIbbeta que convierte favorable (CCG) a Arg (CGG) en el residuo 74. La calidad de homozigoto de la mutación fue confirmada por análisis alelo-específico de la restricción, análisis del microsatellite del cromosoma 22 y borrar meridional cuantitativo. El mutante GPIbbeta fue transcrito normalmente. Los estudios transitorios de la transfección confirmaron que el mutante GPIbbeta deteriora la expresión superficial de GPIb/IX, demostrando que la mutación es responsable de un fenotipo de BSS observado en el paciente. ( info) |