1/47. Diagnosis prenatal de la carencia de proteínas bifuncional de la deshidrogenasa peroxisomal de D-3-hydroxyacyl-CoA dehydratase/D-3-hydroxyacyl-CoA. La diagnosis prenatal de la deficiencia bifuncional de la proteína de la deshidrogenasa peroxisomal de D-3-hydroxyacyl-coenzyme A (CoA) dehydratase/D-3-hydroxyacyl-CoA (D-BP) fue realizada por análisis peroxisomal de la beta-oxidación, la coloración indirecta de la inmunofluorescencia, el análisis del immunoblot, y el análisis del gene de los amniocytes cultivados obtenidos de un feto en 16 weeks' edad gestacional. La actividad de la beta-Oxidación, medida por [1-14C] la oxidación del ácido lignocérico, marcado fue disminuida comparada con los controles. Los peroxisomes grandes fueron identificados fácilmente por la inmunofluorescencia que manchaba con la catalasa anti-humana, como fue encontrado en los pacientes divulgados. El material del D-BP de Immunoreactive era ausente en el análisis y la inmunofluorescencia del immunoblot que manchaban con el D-BP anti-humano. El análisis reverso de la reacción en cadena de polimerasa del transcriptase (RT-PCR) reveló la presencia de la misma canceladura de 237 puntos de ebullición en el cDNA como ésa detectada en un hermano (el proband). El feto autopsied demostró que el aspecto y el D-BP faciales característicos eran deficientes en immunoblot y estudios immunohistopathological de los tejidos fetales. No se identificó ninguÌn desorden neuronal de la migración. Ésta parece ser la primera diagnosis prenatal de la deficiencia del D-BP. ( info) |
2/47. Desordenes de Peroxisomal: estudios clínicos y bioquímicos en 15 niños y diagnosis prenatal en 7 familias. Describimos los resultados clínicos y bioquímicos principales en 15 pacientes con desordenes peroxisomal, junto con los resultados de 11 investigaciones prenatales para el síndrome de Zellweger. La diagnosis inicial del laboratorio dependió en la mayoría de los casos de la demostración de ácidos grasos muy con cadena larga elevados en plasma, pero los estudios complementarios usando fibroblastos cultivados eran esenciales para la clasificación completa. El grupo paciente abarca nueve casos del síndrome de Zellweger, uno de adrenoleucodystrophy neonatal, dos de la enfermedad infantil de Refsum, uno de carencia de proteínas bifuncional, y dos de punctata rizomélico del chondrodysplasia. El estudio ilustra la variabilidad clínica y bioquímica de este grupo de pacientes y de los estudios detallados que se requieran para la clasificación. ( info) |
3/47. Diagnosis y carta recordativa de un caso del desorden peroxisomal con mosaicism peroxisomal. Los fenotipos del desorden de Peroxisomal son el resultado de las mutaciones que causan la asamblea o alteraciones peroxisomal defectuosa en el mecanismo de la importación de las proteínas peroxisomal que llevan a las disfunciones peroxisomal múltiples, o el resultado de una deficiencia enzimática peroxisomal con una sola disfunción peroxisomal. Con análisis de la complementación, han encontrado a 16 grupos. La asignación del defecto genético se ha descrito para algunos de los grupos de la complementación. Describimos la evolución y la carta recordativa clínicas durante 10 años de un paciente que pertenezca al grupo 4 de la complementación, aunque él demostrara un curso clínico más suave. Se ha encontrado en diversas poblaciones peroxisome de los fibroblastos, proceso del normal y expresión de las proteínas PTS1 y PTS2 de la beta-oxidación, distribución anormal de la proteína de ALD y biosíntesis del plasmalógeno del normal; los metabilitos anormales de la beta-oxidación también se han detectado en suero. Los estudios ultraestructurales en hígado demostraron mosaicism peroxisomal como en fibroblastos. Se ha considerado que el mosaicism peroxisomal puede llevar a la variabilidad en los parámetros de diagnóstico peroxisomal, haciendo difícil la diagnosis final en estos pacientes. ( info) |
4/47. Acidemia de Hyperpipecolic: observaciones clínicas, bioquímicas, y radiológicas. El ácido de Pipecolic es un marcador bioquímico detectado con frecuencia en los desordenes peroxisomal del grupo 1 (desordenes peroxisomal de la biogénesis). Su presencia, además de la constelación de manifestaciones fenotípicas particulares y de resultados patológicos, ha llevado a su clasificación reciente bajo desordenes de la biogénesis peroxisomal como entidad separada de la enfermedad (acidemia o hyperpipecolatemia hyperpipecolic). Los resultados clínicos, bioquímicos, y radiológicos observados en tres pacientes diagnosticados con acidemia hyperpipecolic se divulgan. ( info) |
5/47. Mecanismo molecular de las partículas catalasa-que contienen perceptibles, peroxisomes, en fibroblastos de un paciente de PEX2-defective. Los pacientes con los desordenes peroxisome de la biogénesis (PBD) pueden ser identificados por la detección de peroxisomes en sus fibroblastos, por medio de la coloración immunocytochemical usando un anticuerpo de la anti-catalasa. Divulgamos aquí datos sobre tres pacientes de PBD con mutaciones nuevamente identificadas (del550C y del642G) en el gene PEX2 que codifica 35-kDa una membrana peroxisomal el membrana-atravesar y A.C. con proteínas - región cisteína-rica terminal de dos. Algunos de los fibroblastos del paciente con la mutación de del642G contuvieron partículas catalasa-que contenían numerosas, mientras que no se encontró ningunos fibroblastos que contenían tales partículas en el paciente con la mutación de del550C. Confirmamos que la mutación de del642G causó un defecto parcial en síntesis peroxisome y la importación por la expresión del PEX2 transformado en las células del mutante de PEX2-defective CHO. Proponemos que los dos segmentos membrana-que atraviesan supuestos en Pex2p sean dominios importantes para la asamblea y la importación peroxisome y que un defecto en uno de estos dominios afecta seriamente a pacientes de PBD. Además, un defecto en la porción del C-terminal de Pex2p expuesto al cytosol que contenía un adorno del dedo anular causó el fenotipo suave, las actividades enzimáticas residuales, y los peroxisomes perceptibles del mosaico en fibroblastos del paciente. ( info) |
6/47. Expresión de desarrollo y patológica de enzimas peroxisomal: su relación de la carencia de proteínas y del síndrome D-bifuncionales de Zellweger. Presentamos los cambios de desarrollo de enzimas peroxisomal, de la catalasa, de la proteína L-bifuncional (L-BF) y de la proteína D-bifuncional (D-BF), en los cerebros normales, y los pacientes con la deficiencia de D-BF, una nueva enfermedad peroxisomal. El immunoreactivity de D-BF fue observado en controles desde 13 semanas gestacionales (GW) y aumentado con la maduración. El patrón adulto con la coloración fina del gránulo de somata y de dendritas llegó a ser evidente en adolescencia. El L-BF apareció en 20 GW en la corteza cerebral y las células de Purkinje y el glia positivo aparecieron temprano en la materia blanca en 17 GW, y después aumentaron con edad. Las neuronas positivas a la catalasa fueron identificadas de manera semejante como L-BF, deficiencia de D-BF en feto e immunoreactivity marcado disminuido demostrado niño de la enzima. Los pacientes demuestran la expresión reducida de D-BF. El síndrome de Zellweger demuestra la expresión disminuida para las tres proteínas. Este estudio demuestra que las enzimas peroxisomal pueden ser estrechamente vinculadas a la maduración y al gliogenesis neuronales en cerebro humano y al disturbio de la migración neuronal como visto en el síndrome de Zellweger significativo. La deficiencia de D-BF puede exhibir una gama de síntomas durante los períodos infantiles neonatales y tempranos algunos cuyo puede ser similar al síndrome de Zellweger. ( info) |
7/47. Deficiencia de la deshidrogenasa de D-hydroxyacyl-CoA. Identificación de un nuevo desorden peroxisomal con las implicaciones para otros desordenes de la beta-oxidación. Los segundos y terceros pasos de la beta-oxidación peroxisomal son catalizados por dos enzimas de múltiples funciones: proteína D-bifuncional y proteína L-bifuncional. Aquí demostramos que los fibroblastos de un paciente descrito como siendo deficientes en el componente de la deshidrogenasa de 3 hydroxyacyl-CoA de la proteína D-bifuncional y los fibroblastos de un paciente descrito como siendo deficientes en proteína L-bifuncional no complementan uno otro. Usando un método desarrollado recientemente para medir la actividad de la proteína D-bifuncional en homogenados del fibroblasto, encontramos que la actividad de la proteína D-bifuncional era totalmente deficiente en el paciente con carencia de proteínas L-bifuncional presumida. ( info) |
8/47. Dos mutaciones nuevas en el gene adrenoleukodystrophy en dos familias japonesas sin relación y el efecto de largo plazo del trasplante de la médula. Identificamos dos mutaciones sin sentido nuevas en el exón 1 del gene adrenoleukodystrophy (ALD) en dos familias japonesas sin relación. Primer, transición de G (el 874) C dan lugar substitución de Arg (163) a la favorable en el dominio citoplásmico de la proteína de ALD en familia adrenomyeloneuropathy. El segundo, C (679) G da lugar a la substitución de Ser (98) Trp en el primer lazo de la transmembrana en familia cerebral del inicio ALD de la niñez. Ambas mutaciones causan la substitución del aminoácido polar (arginina y serina) con aminoácido no polar (prolina y triptófano). El trasplante de la médula (BMT) el suyo no-afectado su hermana más joven fue realizado en un muchacho con el inicio ALD cerebral de la niñez que demostró anormalidades neurológicas del déficit y del cerebro MRI. Evaluamos el efecto de BMT durante un período de seis años en términos de déficit neurológico, nivel de los ácidos grasos de la muy-largo-cadena (VLCFA) en plasma y fibroblastos, y cerebro MRI. Después de BMT, patient' donor' substituyeron a los glóbulos blancos periféricos de s; s XX unos que llevaban un gene del normal ALD confirmado por el hibridación in situ usando la DNA basada en los satélites del centrómero de los cromosomas de X y de Y como puntas de prueba y el nivel de VLCFA en linfocitos estaba dentro de límite normal. Sin embargo, su estado neurológico deterioró progresivamente. BMT no le era beneficioso. ( info) |
9/47. Mutación termosensible de PEX6 en desordenes peroxisome de la biogénesis en el grupo C (CG-C) de la complementación: estudio comparativo de PEX6 y de PEX1. Los desordenes de la biogénesis de Peroxisome (PBD), incluyendo el síndrome de Zellweger, enfermedad adrenoleukodystrophy, e infantil neonatal de Refsum, son un grupo de enfermedades de un autosoma-recesivas genético heterogéneas causadas por mutaciones en los genes que codifican peroxins, proteínas de PEX requeridas para la biogénesis peroxisome. Los pacientes del síndrome de Zellweger presentan el fenotipo más severo, mientras que los pacientes adrenoleukodystrophy neonatales son intermedios y los pacientes infantiles de la enfermedad de refsum tienen las características más suaves. PEX6 es un gene causativo para PBD del grupo C (CG-C) de la complementación y codifica el peroxin Pex6p, una de las ATpasas asociadas a actividades celulares diversas y miembro de la misma familia de proteínas que Pex1p, una proteína causativa para PBD de CG-E (CG1). Aquí, identificamos la sensibilidad de temperatura de peroxisomes en los fibroblastos de un paciente con adrenoleukodystrophy neonatal en el CG-C. Peroxisomes morfológicamente y bioquímico fue formado en 30 grados de C pero no en 37 grados de C. Este paciente era homocigótico para una mutación sin sentido, T--> C en el nucleótido 170 dando por resultado un cambio de la leucina a la prolina en el aminoácido 57 (L57P) en Pex6p. Los mutantes de la célula del CG-C (ZP92) en el ovario chino del hámster transfected con L57P en HsPEX6 revelaron el mismo fenotipo termosensible. Sin embargo, los mutantes chinos de la célula del ovario del hámster de PEX1-deficient (ZP101) transfected con L111P en PEX1, las contrapartes a L57P en PEX6, no demostraron ninguna sensibilidad de temperatura. Además, ZP92 transfected con G708D en PEX6, las contrapartes a la mutación termosensible G843D en PEX1, no reveló ninguÌn fenotipo termosensible. Estos resultados indican que L57P en Pex6p es una mutación termosensible que causa el fenotipo más suave en un paciente con PBD en el CG-C. También indican que los residuos del aminoácido responsables de sensibilidad de temperatura no parecen ser conservados entre Pex6p y Pex1p. ( info) |
10/47. Expresión realzada de los gangliósidos de las uno-series en fibroblastos de pacientes con desordenes peroxisome de la biogénesis. Los desordenes de la biogénesis de Peroxisome (PBD) se clasifican en el síndrome de Zellweger (ZS), la enfermedad infantil de Refsum (IRD) y adrenoleukodystrophy neonatal. Los disturbios en la diferenciación de células de los nervios tales como detención de la migración son característicos de PBD. La patogenesia de estos disturbios no se entiende hasta ahora claramente. Describimos un metabolismo alterado de glycosphingolipids en PBD que todavía no se ha investigado. Observamos una cantidad creciente de los gangliósidos de las uno-series, GM2, GM1 y GD1a, en los fibroblastos de pacientes con ZS e IRD. Los gangliósidos GM1 y GD1a no estaban presentes en cantidades perceptibles en temas normales. Un paso dominante en la síntesis de los gangliósidos de las uno-series es una transferencia de GalNAc al gangliósido GM3, nosotros determinó tan el nivel del gangliósido GM3 por métodos immunohistochemical. Encontramos una estructura granular, que era positiva hacia el anticuerpo del anti-gangliósido GM3 en el citoplasma del patients' fibroblastos. En células del control, la membrana celular era levemente positiva hacia el anticuerpo anti-GM3. Estos resultados pueden ayudar a aclarar la patogenesia de PBD con respecto al papeles funcional de glycosphingolipids en la diferenciación de célula, la proliferación y el apoptosis. ( info) |