1/85. Caracterização molecular de duas mutações no alfa de Ib da glicoproteína da plaqueta (GP) em duas famílias finlandesas da síndrome de Bernard-Soulier. A síndrome de Bernard-Soulier (BSS) é uma desordem e um macrothrombocytopenia hereditários raros do sangramento que seja causado por um defeito na glicoproteína Ib/IX/V da plaqueta (complexo do GP Ib/IX/V), o receptor para o fator de von willebrand e thrombin. Aqui nós relatamos a base molecular do formulário clássico de BSS em dois pacientes finlandeses não relacionados, ambos com life-long uma história do sangramento severo. O fluxo cytometry e que immunoblotting não mostrou nenhuma expressão do alfa do GP Ib/IX, do GP Ib, do GP Ib beta ou do GP IX (menos de 10%) no patients' plaqueta. Nenhuma expressão do GP V (< 10%) foi observado no propositus 1, mas uma quantidade residual foi encontrada no propositus 2 (24%). O ADN que arranja em seqüência a análise revelou que o propositus 1 era heterozygous composto para um apagamento dos dois-base-pares em Tyr505 (TAT) e em uma mutação de ponto Leu129 (CTC) pro (CCC) no gene do alfa do GP Ib. O Propositus 2 era homozygous para (TAT) o apagamento Tyr505. Os nove parentes que eram heterozygous para qualquer uma das mutações igualmente tiveram baixos níveis do alfa do GP Ib (74-90%). Daqui, os pacientes de Bernard-Soulier homozygous ou heterozygous compostos para Tyr505 (TAT) são severamente afetados. Interessante, ambas as mutações foram encontradas independente outras em três famílias em relatórios precedentes, sugerindo seu idade antiga ou ' mutational; spot' quente;. ( info) |
2/85. A interação crítica da glicoproteína (GP) IBbeta com causa genética de GPIX-a da síndrome de Bernard-Soulier. A síndrome de Bernard-Soulier é uma desordem rara do sangramento causada por um defeito quantitativo ou qualitativo no complexo da glicoproteína da plaqueta (GP) Ib/IX. O complexo é compor de quatro subunits, GPIbalpha, GPIbbeta, GPIX, e GPV. Aqui nós descrevemos a base molecular de uma variação nova da síndrome de Bernard-Soulier em um paciente em quem GPIbalpha e GPIX eram undetectable na superfície da plaqueta. A análise da seqüência do ADN mostrou a seqüência normal para GPIbalpha, GPIX, e GPV. O gene de GPIbbeta foi traçado à região 22q11.2 de cromossoma 22 que foi suprimido de um cromossoma deste paciente. Havia um único apagamento do nucleotide dentro do codon para Alá 80 em GPIbbeta dentro do outro alelo. Esta mutação causa um deslocamento translational do frame que codifique para 86 ácidos aminados alterados e prever ácidos aminados prematuros de um batente 15 brevemente do comprimento do selvagem-tipo proteína. O coexpression transiente do mutante GPIbbeta nas pilhas 293T com selvagem-tipo GPIbalpha e GPIX conduziu à expressão de superfície de GPIbalpha, mas à ausência de GPIX. Além disso, quando um plasmídeo que codifica o selvagem-tipo GPIbbeta transfected transiente nas pilhas chinesas do ovário do hamster que expressam estàvel GPalpha, que retêm a capacidade aos reexpress GPIX, havia um aumento significativo na expressão de superfície de GPIX. Ao contrário, quando o mutante GPIbbeta transfected transiente nestas pilhas, GPIX não reexpressed na superfície do plasma. Assim, um apagamento de uma cópia de GPIbbeta e um único apagamento do nucleotide no codon para Alá 80 dentro do alelo restante de GPIbbeta causam o phenotype de Bernard-Soulier com uma interação de GPIbbeta com o GPIX tendo por resultado a ausência de GPIbalpha na membrana de plasma. A interação de GPIbbeta com GPIX é essencial para a expressão funcional de GPIbalpha. ( info) |
3/85. Heterozygosity composto (del 554-589, transição de C515-T) no gene alfa de Ib da glicoproteína da plaqueta em um paciente com uma tendência severa do sangramento. As plaqueta gigantes na mancha do sangue, in vitro na aglutinação ausente da plaqueta em resposta ao ristocetin, e na agregação normal, no secretion do ATP e na formação do thromboxane B2 foram encontradas em um paciente novo com uma tendência life-long de sangramento. o fator Ristocetin-induzido de von Willebrand que liga a suas plaqueta era menos de 10% do normal. A análise cytometric do fluxo com anticorpos monoclonais LJ-Ib-1, LJ-Ib-10, e LJ-P3 era consistente com último encontrar. A análise de SDS-PAGE de plaqueta solubilized mostrou uma redução marcada da glicoproteína da plaqueta (GP) Ibalpha. A caracterização genética demonstrou que o paciente e seu pai eram heterozygous para um apagamento de 36 nucleotides (posições 554-589) que conduzem a um mutante GPIalpha (apagamento dos ácidos aminados do resíduo 169 a 180 e de um Glu --> Substituição de Lys no resíduo 181). Além, A.A. --> A transição de T no nucleotide 515 no outro alelo do gene de GPIbalpha foi encontrada no paciente e em sua mãe essa resultados na substituição da alanina para o valine no codon 156 (tipo Bolzano de Bernard-Soulier). Estas variações ocorreram dentro do VI e de VII repetições leucina-ricas. A variação nova da síndrome de Bernard-Soulier identificada sugere mais que a integridade de repetições leucina-ricas seja importante para a função normal do complexo do receptor do GP Ib-IX-V. ( info) |
4/85. Desordens gigantes da plaqueta nas crianças do African-American diagnosticadas mal como o purpura thrombocytopenic idiopático. Uma revisão retrospectiva da carta de seis crianças do African-American com um diagnóstico dos macrothrombocytopenias (MTCP) foi executada para avaliar a exatidão de seu diagnóstico. O seguinte foi diagnosticado nas seis crianças com MTCP: Síndrome de Fechtner (duas crianças), síndrome de Sebastian (uma criança), e MTCP anónimo (três crianças). Em cinco famílias, o purpura thrombocytopenic idiopático crônico (ITP) foi diagnosticado no propositus, que conduziu na terapia usando esteróides, imunoglobulina intravenosa (IVIG), e a um splenectomy do caso. Os sintomas do sangramento eram geralmente suaves. Todos os seis pacientes estiveram com o thrombocytopenia variar de 10 a 125 x 10 (9) /L com volume médio da plaqueta de 8 a 20 fL. Os tempos do sangramento eram anormais em dois de três pacientes, e a agregação da plaqueta era anormal em três de quatro pacientes testados. A medula aspira foi relatada como megakaryocytes aumentados nos três pacientes em quem o procedimento foi executado. A morfologia Ultrastructural das plaqueta e das leucócito foi executada em todos os seis pacientes que demonstram plaqueta gigantes em todos os seis pacientes e inclusões da leucócito em três pacientes. Diferenciar MTCP do ITP mais comum pode ser difícil mas importante em evitar estudos diagnósticos desnecessários e a terapia potencial prejudicial associados com o ITP. ( info) |
5/85. Diagnóstico Antepartum da hemorragia intracranial fetal devido à síndrome materna de Bernard-Soulier. FUNDO: A síndrome de Bernard-Soulier, uma falta da glicoproteína IB/IX, é uma desordem recessive autosomal rara do sangramento caracterizada pela deficiência orgânica da plaqueta. As mulheres com síndrome de Bernard-Soulier são em risco da imunização de encontro à glicoproteína IB/IX, conduzindo ao thrombocytopenia neonatal do isoimmune severo. CASO: Uma mulher japonesa dos anos de idade 26, grávida 1, para 0, com a síndrome de Bernard-Soulier apresentada em 35 weeks' gestação com mudanças nos testes padrões fetal da frequência cardíaca e nos resultados ultrasonographic que sugeriram fortemente a hemorragia intracranial fetal. A gerência era pela histerectomia cesarean e pelo salpingo-oophorectomy bilateral em 36 semanas, mas o neonate morreu 6 horas após o nascimento. CONCLUSÃO: A imunização materna à glicoproteína IB/IX durante a gravidez pode causar o thrombocytopenia fetal severo e o sangramento intracranial maciço. ( info) |
6/85. Fechamento Vestibular com um silastic obturator--uma alternativa a Young' procedimento de s na diátese de sangramento. A epistaxe é um problema comum e difícil a controlar nos pacientes com desordens do sangramento. Nós apresentamos um exemplo da epistaxe periódica em um paciente com síndrome de Bernard-Soulier (uma desordem da plaqueta) e descrevemos um método não invasor mas eficaz de fechar o vestibule nasal usando um silastic obturator assim impedindo os efeitos de secagem do fluxo de ar na mucosa nasal que pode precipitar a epistaxe nos pacientes com uma diátese do sangramento. ( info) |
7/85. Cys97--> A mutação de Tyr no gene da glicoproteína IX associou com a síndrome de Bernard-Soulier. A síndrome de Bernard-Soulier (BSS) é uma desordem recessive autosomal do sangramento devido às anomalias quantitativas ou qualitativas no complexo da glicoproteína (GP) Ib/IX/V, o receptor da plaqueta para o fator de von willebrand. Nós descrevemos aqui a base genética da desordem em um paciente com BSS. Análise cytometric do fluxo do patient' as plaqueta de s mostraram um GPIbalpha extremamente reduzido e um GPIX completamente ausente a expressão de superfície. A análise de Immunoblot divulgou GPIbalpha extremamente reduzido e quantidades residuais de GPIbbeta e de GPIX nas plaqueta. O ADN que arranja em seqüência a análise revelou o paciente para ser homozygous para uma mutação missense nova no gene de GPIX que converte Cys (TGT) a Tyr (TAT) no resíduo 97. Os estudos transientes do transfection confirmaram que o mutante GPIX não estêve expressado nas pilhas transfected, mostrando que a mutação era responsável para o phenotype de BSS observado no paciente. ( info) |
8/85. Síndrome adquirida de Bernard-Soulier: um caso com vasculitis necrotizing e thrombosis. Nós descrevemos um paciente com os anticorpos antinucleares positivos, gammopathy e de nível elevado polyclonal de immunocomplexes de circulação, tendo por resultado o purpura vascular. Além, o paciente teve uma estadia de sangramento ligeiramente prolongada e um defeito isolado da agregação ristocetin-induzida da plaqueta (RIPA) no plasma plaqueta-rico (PRP). O patient' o plasma de s igualmente inibiu RIPA em PRP normal e na suspensão normal da plaqueta. A atividade e a estrutura multimeric do fator plasmático de von Willebrand não mostraram nenhuma alteração. Nós poderíamos demonstrar um autoantibody de encontro à glicoproteína da membrana da plaqueta (GP) Ib, usando um ELISA-tipo ensaio. Estes dados sugerem uma síndrome adquirida de Bernard-Soulier. Nós sugerimos que o paciente tenha um vasculitis leukocytoclastic immunocomplex-negociado acompanhado da produção de autoantibodies antinucleares assim como a presença de um autoantibody de encontro ao GPIb. O titer do anticorpo anti-GPIb, entretanto, era demasiado baixo induzir o plaqueta-tipo significativo tendência do sangramento, simplesmente as alterações do laboratório foram encontradas. Além disso, em um estado avançado de sua doença, desenvolveu um vasculitis necrotizing severo que fosse seguido por um thrombosis venoso profundo. ( info) |
9/85. A expressão de superfície do alfa do ib da glicoproteína é dependente do ib da glicoproteína beta: evidência de uma mutação nova que causa a síndrome de Bernard-Soulier. A síndrome de Bernard-Soulier é uma desordem rara do sangramento causada por um defeito quantitativo ou qualitativo no complexo de Ib-IX-V da glicoproteína da plaqueta (GP). O complexo, que sere como um receptor da plaqueta para o fator de von willebrand, é compor de 4 subunits: Alfa do GPIb, GPIb beta, GPIX, e GPV. Nós descrevemos aqui a base molecular de um formulário novo da síndrome de Bernard-Soulier em um paciente em quem os componentes do complexo GPIb-IX-v eram undetectable na superfície da plaqueta. Embora a imagem latente confocal confirmasse que o alfa do GPIb não estava atual na superfície da plaqueta, o alfa do GPIb era prontamente detectável no patient' plaqueta de s. Além disso, a imunoprecipitação do plasma com os anticorpos monoclonais específicos identificou circulando, alfa solúvel do GPIb. a análise da ADN-seqüência revelou seqüências normais para o alfa do GPIb e o GPIX. Havia uma substituição de G a de A na posição 159 da codificação GPIb do gene beta, tendo por resultado uma terminação prematura da tradução no ácido aminado 21. Os estudos do coexpression transiente deste mutante, W21stop-GPIb beta, junto com o selvagem-tipo GPIbalpha e GPIX, demonstraram uma falha da expressão de GPIX na superfície de pilhas de HEK 293T. Os resultados semelhantes foram obtidos com pilhas chinesas do alfa IX do ovário do hamster, uma linha celular estável que expressa GPIbalpha que retem a capacidade re-expressa GPIX. Assim, nós encontramos que GPIbbeta afeta a expressão de superfície do complexo GPIb-Ix não suporta a inserção do alfa do GPIb e do GPIX na membrana da plaqueta. (sangue. 2000; 96: 532-539) ( info) |
10/85. Pro74 Homozygous--> A mutação de Arg no gene de Ibbeta da glicoproteína da plaqueta associou com a síndrome de Bernard-Soulier. A síndrome de Bernard-Soulier (BSS) é uma desordem recessive autosomal do sangramento devido às anomalias quantitativas ou qualitativas no complexo da glicoproteína (GP) Ib/IX/V, o receptor da plaqueta para o fator de von willebrand. Este complexo é compor de quatro subunits, GPIbalpha, GPIbbeta, GPIX e GPV. Nós descrevemos aqui a base genética da desordem em um paciente com BSS. Análise cytometric do fluxo do patient' as plaqueta de s mostraram GPIbalpha e GPIX extremamente reduzidos a expressão de superfície. A análise de Immunoblot divulgou a ausência de GPIbalpha, de GPIbbeta e de GPIX nas plaqueta. O ADN que arranja em seqüência a análise revelou uma mutação missense nova no gene de GPIbbeta que converte pro (CCG) a Arg (CGG) no resíduo 74. O Homozygosity da mutação foi confirmado a análise alelo-específica da limitação, a análise do microsatellite do cromossoma 22 e pela mancha do sul quantitativa. O mutante GPIbbeta foi transcrito normalmente. Os estudos transientes do transfection confirmaram que o mutante GPIbbeta danifica a expressão de superfície de GPIb/IX, mostrando que a mutação é responsável para um phenotype de BSS observado no paciente. ( info) |