1/84. L'enzyme étudie dans le gangliosidiosis GM2, et leur application dans le diagnostic prénatal. L'analyse du hexosaminidase a et des enzymes de B dans quatre cas avec la tache développementale de rouge de régression et de cerise à l'examen de fond a confirmé que trois cas ont eu la maladie de tay-sachs, et un cas a eu la maladie de sandhoff. Le diagnostic prénatal a été effectué par titrage de l'enzyme de hexosaminidase en fluide aniotique et cellules dans une famille, et échantillon de villus chorionique dans la deuxième famille. Le foetus a été diagnostiqué pour être inchangé dans un, et affecté dans l'autre famille. L'analyse du hexosaminidase a et B est utile pour le diagnostic spécifique du gangliosidosis GM2, et pour que le diagnostic prénatal réduise le fardeau de ces désordres. ( info) |
2/84. diagnostic prénatal d'un famille japonais en danger pour la maladie de tay-sachs. Application d'une méthode allèle-spécifique concurrentielle fluorescente de l'amplification en chaîne par réaction (ACP). La maladie de tay-sachs (DST) est provoquée par la mutation du gène HEXA, qui a comme conséquence une insuffisance de l'alpha-sous-unité de hexosaminidase a. La mutation principale dans le DST japonais est a G--T à la transversion au 3' ; - emplacement d'épissure de l'intron 5. Nous avons établi une méthode allèle-spécifique concurrentielle fluorescente de l'amplification en chaîne par réaction (FCAS-PCR) pour la détection de la mutation et nous sommes appliqués l'au diagnostic prénatal d'une famille japonaise de DST. FCAS-PCR a distingué les allèles sauvages et de mutant clairement, avec de larges gammes dans la quantité d'adn de calibre, la concentration en dNTP, la concentration en mgcl2 et le nombre de cycles d'ACP. Après obtention de l'approbation de Comité d'Éthique et du consentement au courant des parents dans le famille d'index, le prélèvement de villus chorionique a été effectué. L'analyse de FCAS-PCR utilisant l'adn de villus chorionique a révélé que le foetus était homozygote pour la mutation. Pour confirmer le diagnostic, l'analyse de ordonnancement directe du fragment genomic d'ACP a été exécutée, et a donné les mêmes résultats que ceux de l'analyse de FCAS-PCR. FCAS-PCR s'est avéré utile pour le criblage de porteur et le diagnostic prénatal dans des familles de DST dans la population japonaise. Ce serait également une méthode adn-diagnostique utile pour beaucoup d'autres désordres hérités. ( info) |
3/84. spectroscopie 31Phosphorus de résonance magnétique dans la maladie de tay-sachs de tard-début. La forme de tard-début du gangliosidosis GM2 (la maladie de tay-sachs) est un désordre autosomal-récessif avec la maladie neurologique progressive, principalement caractérisée par le neurone moteur et le dysfonctionnement spinocerebellar. La majorité de patients sont d'origine juive d'Ashkenazi. la spectroscopie 31Phosphorus de résonance magnétique du cerveau a été exécutée pour étudier les changements métaboliques d'un patient de 16 ans présentant la maladie de tay-sachs de tard-début qui a eu un Gly269 hétérozygote--> ; Mutation de Ser dans le gène de codage du hexosaminidase a dans l'hétérozygotie composée avec des autres, pourtant mutation non identifiée. Les changements graves du métabolisme de phosphore avec une quantité diminuée de phosphodiesters et membrane-bondissent des phosphates ont été démontrés, suggérant une activation des phosphodiestérases en accumulant des gangliosides. Les résultats cliniques ont été bien liés aux changements des métabolites au spectroscope déterminés. ( info) |
4/84. Ptosis dans la maladie infantile en retard de Tay-Sachs. La brève communication décrit un enfant de 2 ans qui s'est présenté avec l'accomplissement et la régression des étapes importantes, les saisies retardées des types multiples, la réponse exagérée au bruit, l'incapacité de voir et les taches bilatérales de rouge de cerise. En plus de ces manifestations typiques de la variété infantile en retard de la maladie de tay-sachs, le ptosis unilatéral était présent. La formation image de résonance magnétique du cerveau a indiqué des anomalies compatibles à une étape avancée de la maladie. ( info) |
5/84. Résultats neuroradiological de la variante B1 du gangliosidosis GM2. La variante B1 est un type rare de gangliosidosis GM2. Médicalement, elle montre une gamme étendue de formes s'étendant d'infantile au juvénile. Nous rapportons les premiers résultats de résonance magnétique de la formation image (MRI) de trois patients affectés par la variante du gangliosidosis GM2 B1, deux se présentant avec la forme infantile et une avec la forme juvénile. Les aspects de MRI des deux patients présentant la maladie infantile de forme sont conformes à ceux rapportés pour le type de tôt-début des deux maladies de Tay-Sachs et de Sandhoff, et sont caractérisés par la participation tôt des ganglions basiques et du thalamus avec l'atrophie corticale apparaissant plus tard. En revanche, le patient présentant la forme juvénile de la variante B1 montrée l'atrophie progressive corticale et de blanc-matière des structures supratentorial et, à un moindre degré, des structures infratentorial. On n'a observé aucun ganglion basique ou anomalie thalamic. Puisque sous les formes adultes des maladies de Tay-Sachs et de Sandhoff une atrophie cérébelleuse progressive représente la seule anomalie discernable, il s'avère qu'un modèle de MRI particulier au gangliosidosis GM2 peut être défini. Ce modèle s'étend des dommages de ganglions basiques liés au processus tôt et grave de demyelination remarquable sous la forme infantile de la maladie, à l'atrophie cérébelleuse sans des anomalies supratentorial sous la forme adulte. Un " ; intermediate" ; On peut observer l'image de MRI, avec l'atrophie corticale et l'atrophie cérébelleuse douce, mais sans affaiblissement de ganglions basiques, sous la forme juvénile. En outre, nos investigations suggèrent que les anomalies de MRI dans le gangliosidosis GM2 se corrèlent avec la forme clinique de la maladie plutôt qu'avec la variante biochimique du défaut enzymatique. ( info) |
6/84. Caractérisation biochimique et moléculaire du hexosaminidase a de mutant dans un famille turc. FOND : La maladie de tay-sachs est une forme de gangliosidosis du triaose de monosialoganglioside (GM2) ce des résultats des mutations dans le gène d'alpha-sous-unité du hexosaminidase a. Dans la variante B1, l'emplacement actif de l'alpha-sous-unité de l'enzyme est vraisemblablement affecté. Dans la présente étude, un patient qui avait été précédemment diagnostiqué car une variante B1 est encore analysée. Le patient' ; des parents et le frère de s ont été également analysés. MÉTHODES : Le polymorphisme conformationnel monocatenaire (SSCP) et l'adn ordonnançant l'analyse ont été conduits dans tous les cas. En outre, hexosaminidase a (le sortilège A) a été isolé dans des homogénats de leucocyte du patient' ; des parents de s et le frère employant la chromatographie d'échange ionique de De 52, et les analyses de thermostabilité des enzymes d'isolement ont été exécutés. RÉSULTATS : hexosaminidase a des parents s'est avéré plus thermostable qu'une adn normalement du sortilège A. ordonnançant l'analyse a indiqué une mutation de suppression de 12 points d'ébullition dans l'exon 10 du gène du sortilège A. Le patient était un homozygote et les parents étaient des heterozygotes pour la mutation, qui pourrait également être observée aux doubles rives d'adn par analyse de SSCP. Ces bases supprimées sont situées dans le domaine catalytique de l'alpha-sous-unité. CONCLUSIONS : La mutation de suppression de 12 points d'ébullition dans l'exon 10 du sortilège A est responsable de la plus grande thermostabilité de l'enzyme. Vu que cette mutation a été précédemment trouvée dans un patient turc de Tay-Sachs, le patient dans la présente étude peut avoir une autre mutation sur le gène du sortilège B qui cause la thermostabilité diminuée de l'enzyme. L'analyse thermique d'inactivation peut ne pas être suffisante pour un diagnostic correct dans de tels cas peu communs. ( info) |
7/84. Une nouvelle mutation ponctuelle (G412 à A) au dernier nucléotide d'exon 3 de l'épissure d'affects de gène d'alpha-sous-unité de hexosaminidase. Nous rapportons la sixième mutation liée à la forme infantile de la maladie de tay-sachs dans la population turque. La mutation est une transition simple de nucléotide (G à A) au dernier nucléotide d'exon 3 de hexosaminidase a (gène d'alpha-sous-unité de SORTILÈGE A). Les 14 exons et leurs ordres de flanquement du gène du SORTILÈGE A ont été amplifiés et analysés par le polymorphisme conformationnel échoué réaction-simple de chaîne de polymérase (PCR-SSCP). L'ordonnancement de l'exon 3 a montré une mutation homozygote. Patient' cultivé ; les fibroblastes de s n'ont produit aucune adn messagère discernable pour le gène d'alpha-sous-unité du SORTILÈGE A par analyse nordique de tache. Nous spéculons que l'adn messagère anormale a été rapidement dégradée après transcription. Nos données sont compatibles à l'idée que la forme infantile grave de la maladie de tay-sachs est associée à un manque total d'activité du sortilège A dans le patient. Une mutation semblable (on avait observé G à T) au 5' ; - emplacement de distributeur d'épissure de l'exon 3. Il a eu comme conséquence l'épissure et sauter anormaux de l'exon 3. Les autres mutations d'emplacement d'épissure d'accepteur et de donateur ont décrit dans le gène du SORTILÈGE A enlèvent l'épissure normale d'adn messagère. L'identification des allèles multiples du SORTILÈGE A de mutant montre l'hétérogénéité moléculaire de la maladie infantile de Tay-Sachs dans notre population. ( info) |
8/84. Un glycine250--> ; la substitution d'aspartate en alpha-sous-unité de hexosaminidase a cause la maladie de tay-sachs de juvénile-début dans une famille Libanais-Canadienne. La mutation causant la maladie juvénile de Tay-Sachs (DST) dans deux sibs d'origine Libanaise-Maronite est décrite. Un extrait adn-contenant des fibroblastes cultivés obtenus à partir d'un des probands a été employé comme calibre pour amplifier la séquence codante du hexosaminidase a (alpha-sous-unité de sortilège A). L'ordonnancement des fragments amplifiés de cDNA a indiqué un changement simple, guanine à l'adénine à NT 749 créant une mutation de G250D. La mutation présente un nouvel emplacement d'identification pour l'enzyme Eco rv de restriction, permettant l'identification des heterozygotes pour cet allèle après amplification d'ACP et la digestion d'Eco rv des ordres de l'exon 7 des calibres genomic d'adn. Afin d'examiner l'effet de cette substitution, une construction mutagenized in vitro de cDNA a été présentée dans un vecteur mammifère d'expression et séparément transfected dans des cellules du singe Cos-1 ou avec un bêta-cDNA vecteur d'expression. Quand l'alpha-cDNA de mutant était le seul gène présenté dans des cellules de COS aucune activité enzymatique au-dessus d'activité endogène de cellules de COS n'a été détectée. Cotransfection d'alpha-cDNA normal et de bêta-cDNA suivis d'immunoprécipitation du sortilège humain A a eu comme conséquence l'augmentation de 20 fois du rapport entre les valeurs positives et négatives de commande (de fausse transfection). Ceci a permis la détection d'une certaine activité résiduelle (12% de la commande positive) quand l'alpha-cDNA de mutant a remplacé son sauvage-type contre-parties. L'environnement prévu de protéine dans lequel la mutation se produit est comparé à celui de la mutation de la maladie de tay-sachs d'adulte-début provoquée par un Gly269--> ; Substitution de Ser dans l'exon 7. (ABSTRAIT TRONQUÉ à 250 MOTS) ( info) |
9/84. Un nouvel allèle de la maladie B1 de Tay-Sachs dans l'exon 7 dans deux heterozygotes composés chacun avec une deuxième mutation originale. Trois roman Tay--Des mutations de la maladie de Sachs (DST) ont été identifiées dans deux indépendants, patients hétérozygotes composés non-Juifs. Une mutation de transversion de G772C causant une substitution d'Asp258His est partagée par les deux patients. L'enzyme de mutant avait été caractérisée, sur la base des études cinétiques précédentes (1) comme B1, ou de la mutation active d'emplacement d'alpha-sous-unité. C'est la première mutation B1 non trouvée dans le codon 178 (exon 5). La transition de C.A. 508T causant une substitution d'Arg170Trp s'est également produite dans un des patients. La troisième mutation est une suppression deux basse se produisant dans l'exon 8 impliquant la perte de l'un ou l'autre NTS 927-928 ou 929-930 dans le codon 310. La suppression crée un codon d'arrêt d'inframe 35 bases en aval. La mutation d'Arg170Trp a été également détectée dans un troisième patient indépendant de DST. Dans les deux familles cet allèle a été tracé aux ancêtres canadiens français provenant de la région d'Estrie de la province du Québec. Cette mutation est le troisième allèle de DST unique à la population canadienne française et les origines héréditaires des parents de porteur sont éloignées du centre de la diffusion de la mutation plus commune de suppression de 7.6 kb qui est aux zones orientales de la province. ( info) |
10/84. Hétérozygotie pour le " ; Allele" de DN ; (G533-greater qu'A) du bêta-hexosaminidase alpha gène de sous-unité identifié par l'adn directe ordonnançant dans un famille avec la variante B1 de GM2-gangliosidosis. Un nouveau patient ayant les dispositifs cliniques, pathologiques et biochimiques excessivement de la variante du taux B1 de GM2-gangliosidosis est décrit. Ce patient, de l'ascendance européenne nordique (de non-Ashkenazi), est le premier enfant affecté de cette origine ethnique disponible pour l'analyse génétique moléculaire ; ainsi, elle a représenté une occasion d'identifier une nouvelle mutation liée à ce phénotype ou, réciproquement, pour caractériser plus loin l'allèle de DN de l'alpha gène de hexosaminidase (G533-greater qu'A) comme une mutation plus largement distribuée pas précédemment observée dans ce patrimoine héréditaire. Afin de l'analyse rapide, nous rapportons une stratégie pour l'amplification d'ACP et dirigeons l'ordonnancement d'adn de l'exon 5 de l'alpha gène de hexosaminidase, l'emplacement le plus fréquent des mutations en cette condition. Avec cette technique, le père de l'enfant affecté a été déterminé pour être hétérozygote pour l'allèle de DN, alors que la mère s'avérait pour avoir seulement l'ordre normal dans cette région. Cette observation autre prolonge la distribution géographique et ethnique connue de cette mutation, et suggère la probabilité que l'allèle de DN ait été dérivé par des événements mutational indépendants de multiple. ( info) |