1/2. mutaciones Traficar-competentes y traficar-defectuosas KCNJ2 en el síndrome de Andersen. Las mutaciones en KCNJ2, el gene que codificaba el canal interno Kir2.1 del potasio del rectificador del ser humano, se han identificado en el síndrome de Andersen (o síndrome de Andersen-Tawil), un desorden heredado caracterizado por parálisis periódica, arritmias cardiacas, y características dysmorphic. Identificamos y caracterizamos dos mutaciones nuevas KCNJ2 (c.220A> G/p.T74A y c.443G> C/p.G144A) asociado al síndrome de Andersen. La expresión heteróloga de un tipo salvaje recombinante cDNA humano KCNJ2 (WT-KCNJ2) en las células HEK-293 da lugar al interior robusto que rectifica corrientes, pero no observamos corrientes mensurables de las células que expresaban cualquier mutante. Las células co-transfected con WT-KCNJ2 y cualquier mutante exhibieron la amplitud actual de una entero-célula substancialmente más baja constante con una supresión dominante-negativa de WT-KCNJ2 por los canales del mutante. p.T74A y p.G144A exhiben la expresión robusta de la membrana de plasma, pero un tercero divulgó previamente el tráfico deteriorado exhibido del alelo (p.C101R). Nuestros resultados demuestran consecuencias funcionales de dos mutaciones traficar-competentes nuevas KCNJ2 asociadas al síndrome de Andersen y amplían nuestro conocimiento de la diversidad alélica en esta enfermedad. ( info) |
2/2. La caracterización funcional y clínica de una mutación en KCNJ2 se asoció al síndrome de Andersen-Tawil. FONDO: El síndrome de Andersen-Tawil (ATS) es un desorden heredado raro, caracterizado por parálisis periódica, los dysarrhythmias cardiacos, y las características dysmorphic, y es causado por mutaciones en el gene KCNJ2, que codifica el canal interno del potasio del rectificador, Kir2.1. Este estudio intentó analizar KCNJ2 en pacientes con el ATS familiar y determinar las características funcionales del gene transformado. MÉTODOS Y RESULTADOS: Defendimos a una familia con el ATS heredado para la mutación en KCNJ2, usando la secuencia directa de la DNA. Una mutación sin sentido (T75R) de Kir2.1, situado en el dominio citoplásmico altamente conservado del N-terminal, fue identificada en tres miembros afectados de esta familia. Usando el sistema de la expresión del oocyte del xenopus y los análisis enteros de la abrazadera de voltaje de la célula, encontramos que el mutante de T75R era no funcional y poseímos un efecto negativo dominante fuerte cuando co-estaban expresados con la misma cantidad del tipo salvaje Kir2.1. Los ratones transgénicos (Tg) que expresaban la forma transformada de Kir2.1 en el corazón habían prolongado los intervalos de QTc comparados con los ratones que expresaban el tipo salvaje proteína. Las taquiarritmias ventriculares fueron observadas en 5 de 14 ratones de T75R-Tg comparados con 1 de 7 Peso-Tg y ninguno de 6 littermates no-transgénicos. En tres de cinco ratones de T75R-Tg con taquicardia ventricular, su ECG divulgó taquicardia bidireccional como en nuestro proband. CONCLUSIONES: Los estudios ines vitro revelaron que el mutante de T75R de Kir2.1 tenía un efecto negativo dominante fuerte en el sistema de la expresión del oocyte del xenopus. Todavía preservó la capacidad co-de montar y de traficar a la membrana celular en células mamíferas. Para los estudios ines vivo, los ratones de T75R-Tg tenían taquicardia ventricular bidireccional después de la inducción y de intervalos más largos del cuarto de galón. ( info) |