1/47. diagnostic prénatal de déficience en protéines bifonctionnelle de déshydrogénase peroxisomal de D-3-hydroxyacyl-CoA dehydratase/D-3-hydroxyacyl-CoA. Le diagnostic prénatal de l'insuffisance bifonctionnelle de protéine de déshydrogénase peroxisomal de D-3-hydroxyacyl-coenzyme a (CoA) dehydratase/D-3-hydroxyacyl-CoA (DBP) a été exécuté par analyse peroxisomal de bêta-oxydation, la souillure indirecte d'immunofluorescence, analyse d'immunoblot, et analyse de gène des amniocytes cultivés obtenus à partir d'un foetus à 16 weeks' ; âge gestational. L'activité de bêta-Oxydation, mesurée par [1-14C] oxydation d'acide lignocérique, a été nettement diminuée comparée aux commandes. De grands peroxisomes ont été aisément identifiés par l'immunofluorescence souillant avec de la catalase anti-humaine, comme a été trouvé dans les patients rapportés. Le matériel de DBP d'Immunoreactive était absent sur l'analyse et l'immunofluorescence d'immunoblot souillant avec du DBP anti-humain. L'analyse renversée de l'amplification en chaîne par réaction de transcriptase (RT-PCR) a indiqué la présence de la même suppression de 237 points d'ébullition dans le cDNA en tant que cela détectée dans un enfant de mêmes parents (le proband). Le foetus autopsié a montré que l'aspect et le DBP faciaux caractéristiques étaient déficients sur l'immunoblot et les études immunohistopathological des tissus foetaux. Aucun désordre neuronal de migration n'a été identifié. Ceci semble être le premier diagnostic prénatal de l'insuffisance de DBP. ( info) |
2/47. Désordres de Peroxisomal : études cliniques et biochimiques dans 15 enfants et diagnostic prénatal dans 7 familles. Nous décrivons les résultats cliniques et biochimiques principaux dans 15 patients présentant des désordres peroxisomal, ainsi que les résultats de 11 investigations prénatales pour le syndrome de zellweger. Le diagnostic initial de laboratoire a dépendu dans la plupart des cas de la démonstration des acides gras très à longue chaîne élevés dans le plasma, mais les études complémentaires utilisant les fibroblastes cultivés étaient essentielles pour la classification complète. Le groupe patient comporte neuf cas du syndrome de zellweger, un d'adrenoleucodystrophy néonatal, deux de la maladie infantile de Refsum, un de la déficience en protéines bifonctionnelle, et deux du punctata rhizomelic de chondrodysplasia. L'étude illustre la variabilité clinique et biochimique de ce groupe de patients et des études détaillées qui sont requis pour la classification. ( info) |
3/47. diagnostic et suivi d'un cas de désordre peroxisomal avec le mosaicism peroxisomal. Les phénotypes de désordre de Peroxisomal sont le résultat des mutations qui causent l'assemblée ou les changements peroxisomal défectueux dans le mécanisme d'importation des protéines peroxisomal qui mènent aux dysfonctionnements peroxisomal multiples, ou le résultat d'une insuffisance enzymatique peroxisomal avec un dysfonctionnement peroxisomal simple. Avec l'analyse de complémentation, 16 groupes ont été trouvés. L'attribution du défaut génétique a été décrite pour certains des groupes de complémentation. Nous décrivons l'évolution et le suivi cliniques sur 10 ans d'un patient qui appartient au groupe 4 de complémentation, bien qu'il ait montré un cours clinique plus doux. On l'a trouvé dans différentes populations peroxisome de fibroblastes, traitement de normale et expression des protéines PTS1 et PTS2 de bêta-oxydation, distribution anormale de protéine d'ALD et biosynthèse normale de plasmalogène ; des métabolites anormaux de bêta-oxydation ont été également détectés en sérum. Les études d'ultrastructure dans le foie ont montré le mosaicism peroxisomal comme dans les fibroblastes. On l'a pris en considération que le mosaicism peroxisomal peut mener à la variabilité dans des paramètres diagnostiques peroxisomal, faisant difficile le diagnostic final dans ces patients. ( info) |
4/47. Acidémie de Hyperpipecolic : observations cliniques, biochimiques, et radiologiques. L'acide de Pipecolic est un marqueur biochimique fréquemment détecté dans des désordres peroxisomal du groupe 1 (désordres peroxisomal de biogénèse). Sa présence, en plus de la constellation de manifestations phénotypiques particulières et de résultats pathologiques, a mené à sa classification récente sous des désordres de la biogénèse peroxisomal comme entité séparée de la maladie (acidémie ou hyperpipecolatemia hyperpipecolic). Les résultats cliniques, biochimiques, et radiologiques observés dans trois patients diagnostiqués avec l'acidémie hyperpipecolic sont rapportés. ( info) |
5/47. Mécanisme moléculaire des particules catalase-contenantes discernables, peroxisomes, dans les fibroblastes d'un patient de PEX2-defective. Des patients présentant les désordres peroxisome de biogénèse (PBD) peuvent être identifiés par la détection des peroxisomes dans leurs fibroblastes, au moyen de souillure immunocytochemical utilisant un anticorps d'anti-catalase. Nous rapportons ici des données sur trois patients de PBD présentant des mutations nouvellement identifiées (del550C et del642G) dans le gène PEX2 qui code 35-kDa une membrane peroxisomal membrane-enjambement de deux et C.A. contenant des protéines - région cystéine-riche terminale. Certains des fibroblastes du patient présentant la mutation de del642G ont contenu de nombreuses particules catalase-contenantes, tandis qu'aucun fibroblaste contenant de telles particules n'a été trouvé dans le patient présentant la mutation de del550C. Nous avons confirmé que la mutation de del642G a causé un défaut partiel dans la synthèse peroxisome et l'importation par l'expression du PEX2 muté dans des cellules de mutant de PEX2-defective CHO. Nous proposons que les deux segments de membrane-enjambement putatifs dans Pex2p soient des domaines importants pour l'assemblée et l'importation peroxisome et qu'un défaut dans un de ces domaines affecte sévèrement des patients de PBD. En outre, un défaut dans la partie de C-borne de Pex2p exposé au cytosol contenant un motif de doigt d'ANNEAU a causé le phénotype doux, les activités enzymatiques résiduelles, et les peroxisomes discernables de mosaïque dans les fibroblastes du patient. ( info) |
6/47. Expression développementale et pathologique des enzymes peroxisomal : leur rapport de déficience en protéines et de syndrome D-bifonctionnels de Zellweger. Nous présentons les changements développementaux des enzymes peroxisomal, de la catalase, de la protéine L-bifonctionnelle (livre-force) et de la protéine D-bifonctionnelle (D-BF), des cerveaux normaux, et des patients présentant l'insuffisance de D-BF, une nouvelle maladie peroxisomal. L'immunoreactivity de D-BF a été observé dans les commandes dès 13 semaines gestational (gw) et augmenté avec la maturation. Le modèle adulte avec la souillure fine de granule des somata et des dendrites est devenu évident dans l'adolescence. La livre-force est apparue à 20 gws dans le cortex cérébral et les cellules de purkinje et le glia positif sont apparus tôt dans la matière blanche à 17 gws, et ont puis augmenté avec l'âge. Des neurones positifs à la catalase ont été identifiés de la même manière comme livre-force, insuffisance de D-BF dans le foetus et l'immunoreactivity nettement diminué montré par enfant en bas âge d'enzymes. Les patients démontrent l'expression réduite de D-BF. Le syndrome de zellweger montre l'expression diminuée pour les trois protéines. Cette étude prouve que les enzymes peroxisomal peuvent être étroitement liées à la maturation et au gliogenesis neuronaux dans le cerveau humain et à la perturbation de la migration neuronale comme vu dans le syndrome de zellweger significatif. L'insuffisance de D-BF peut montrer une gamme des symptômes au cours des périodes infantiles néonatales et tôt certains dont peut être semblable au syndrome de zellweger. ( info) |
7/47. Insuffisance de déshydrogénase de D-hydroxyacyl-CoA. Identification d'un nouveau désordre peroxisomal avec des implications pour d'autres désordres de bêta-oxydation. Les deuxièmes et troisième étapes de la bêta-oxydation peroxisomal sont catalysées par deux enzymes multifonctionnelles : protéine D-bifonctionnelle et protéine L-bifonctionnelle. Ici nous prouvons que les fibroblastes d'un patient décrit en tant qu'étant déficients en composant de déshydrogénase de 3 hydroxyacyl-CoA de protéine D-bifonctionnelle et les fibroblastes d'un patient décrit en tant qu'étant déficients en protéine L-bifonctionnelle ne complètent pas un un autre. Suivre une méthode developpée récemment pour mesurer l'activité de la protéine D-bifonctionnelle en homogénats de fibroblaste, nous avons constaté que l'activité de la protéine D-bifonctionnelle était complètement déficiente en patient présentant la déficience en protéines L-bifonctionnelle présumée. ( info) |
8/47. Deux mutations originales dans le gène adrenoleukodystrophy dans deux familles japonaises indépendantes et l'effet à long terme de la transplantation de moelle. Nous avons identifié deux mutations faux-sens originales dans l'exon 1 du gène (ALD) adrenoleukodystrophy dans deux familles japonais indépendants. Premier, transition de G (le 874) C ont comme conséquence substitution d'Arg (163) la pro dans le domaine cytoplasmique de la protéine d'ALD dans la famille adrenomyeloneuropathy. Le deuxième, C (679) G a comme conséquence la substitution de Ser (98) Trp dans la première boucle de transmembrane dans la famille cérébrale du début ALD d'enfance. Les deux mutations causent la substitution de l'acide aminé polaire (arginine et sérine) avec de l'acide aminé non polaire (proline et tryptophane). La transplantation de moelle (BMT) du sien non-affecté sa plus jeune soeur a été exécutée sur un garçon avec le début ALD cérébral d'enfance qui a montré des anomalies neurologiques de déficit et de cerveau MRI. Nous avons évalué l'effet de BMT sur une période de six ans en termes de déficit neurologique, niveau des acides gras de très-long-chaîne (VLCFA) dans le plasma et les fibroblastes, et cerveau MRI. Après BMT, patient' ; des globules sanguins blancs périphériques de s ont été remplacés par donor' ; s XX ceux portants un gène normal d'ALD confirmé par l'hybridation in situ utilisant l'adn satellite du centromère des chromosomes de X et de Y en tant que sondes et le niveau de VLCFA dans les lymphocytes était dans la limite normale. Cependant, son état neurologique a progressivement détérioré. BMT ne lui était pas salutaire. ( info) |
9/47. mutation thermo-sensible de PEX6 dans des désordres peroxisome de biogénèse dans le groupe C (CG-C) de complémentation : étude comparative de PEX6 et de PEX1. Les désordres de biogénèse de Peroxisome (PBD), y compris le syndrome de zellweger, la maladie adrenoleukodystrophy et et infantile néonatale de Refsum, sont un groupe des maladies autosomal-récessives génétiquement hétérogènes provoquées par des mutations dans les gènes de PEX qui codent des peroxins, protéines exigées pour la biogénèse peroxisome. Les patients de syndrome de zellweger présentent le phénotype le plus grave, tandis que les patients adrenoleukodystrophy néonatals sont intermédiaires et les patients infantiles de la maladie de refsum ont les dispositifs les plus doux. PEX6 est un gène causatif pour PBD du groupe C (CG-C) de complémentation et code le peroxin Pex6p, une des atpases liées aux activités cellulaires diverses et un membre de la même famille des protéines que Pex1p, une protéine causative pour PBD de CG-E (CG1). Ici, nous avons identifié la sensibilité de température des peroxisomes dans les fibroblastes d'un patient avec adrenoleukodystrophy néonatal dans le CG-C. Peroxisomes morphologiquement et biochimiquement ont été formés à 30 degrés de C mais pas à 37 degrés de C. Ce patient était homozygote pour une mutation faux-sens, T--> ; C au nucléotide 170 ayant pour résultat un changement de leucine à la proline à l'acide aminé 57 (L57P) de Pex6p. Les mutants de cellules de CG-C (ZP92) chez le hamster chinois que l'ovaire transfected avec L57P dans HsPEX6 ont indiqué le même phénotype thermo-sensible. Cependant, les mutants chinois de cellules d'ovaire de hamster de PEX1-deficient (ZP101) transfected avec L111P dans PEX1, les contre-parties à L57P dans PEX6, n'ont montré aucune sensibilité de température. En outre, ZP92 transfected avec G708D dans PEX6, les contre-parties à la mutation thermo-sensible G843D dans PEX1, n'a indiqué aucun phénotype thermo-sensible. Ces résultats indiquent que L57P dans Pex6p est une mutation thermo-sensible causant le phénotype plus doux dans un patient avec PBD dans le CG-C. Ils indiquent également que les résidus d'acide aminé responsables de la sensibilité de température ne semblent pas être conservés entre Pex6p et Pex1p. ( info) |
10/47. Expression augmentée des gangliosides d'un-séries dans les fibroblastes des patients présentant des désordres peroxisome de biogénèse. Les désordres de biogénèse de Peroxisome (PBD) sont classifiés dans le syndrome de zellweger (ZS), la maladie infantile de Refsum (IRD) et adrenoleukodystrophy néonatal. Les perturbations dans la différentiation des cellules neurales telles que l'arrestation de migration sont caractéristiques de PBD. Jusqu'ici la pathogénie de ces perturbations n'est pas clairement comprise. Nous décrivons un métabolisme changé des glycosphingolipids dans PBD qui n'a pas été encore étudié. Nous avons observé une plus grande quantité de gangliosides d'un-séries, GM2, GM1 et GD1a, dans les fibroblastes des patients avec ZS et IRD. Les gangliosides GM1 et GD1a n'étaient pas présents dans des quantités discernables dans les sujets normaux. Une étape principale dans la synthèse des gangliosides d'un-séries est un transfert de GalNAc au ganglioside gm3, ainsi nous a déterminé le niveau du ganglioside gm3 par des méthodes immunohistochemical. Nous avons trouvé une structure granulaire, qui était positive vers l'anticorps du l'anti-ganglioside gm3 dans le cytoplasme du patients' ; fibroblastes. En cellules de commande, la membrane de cellules était légèrement positive vers l'anticorps anti-GM3. Ces résultats peuvent aider à clarifier la pathogénie de PBD en ce qui concerne les rôles fonctionnels des glycosphingolipids dans la différentiation de cellules, la prolifération et l'apoptosis. ( info) |