1/64. Karakterisering av Epstein - Barr virus (EBV)-smittade naturliga killer (NK) cellen spridning hos patienter med svår mygga allergi, inrättandet av en IL-2-beroende NK-liknande cellinje. Kliniska bevis för ett samband mellan svår överkänslighet till mygga bite (HMB) och klonurvalet utvidgning av EBV-infekterade NK celler har ackumulerats. För att klargöra systemet med EBV-inducerad NK cellen spridning och dess relation med hög incidens av leukemi eller lymfom HMB patienter, vi studerade clonally utökade NK celler från tre HMB patienter och lyckats etablera en EBV-infekterade NK-liknande cellinje utsetts KAI3. Immunoblotting och omvänt transkriptas-Polymeras-kedjereaktion (RT-PCR) analysen visade att såväl KAI3 celler som smittade NK cellerna påvisas en EBV latent smitta typ II, där EBV genuttryck var begränsad till EBNA 1 och LMP1. KAI3 fastställdes genom kultur med IL-2, undersöktes Il2 känsligheten i perifert blod NK celler från patienter. Resultaten representeras markant förstärkta IL 2-inducerad IL-2R alfa uttryck i NK-celler. Här karakteristiska egenskapen kan bidra med ihållande ökningen av smittade NK celler. KAI3 celler samt NK-celler från patienter var dock inte skyddade från apoptos inducerats av antingen en anti-Fas antikropp eller NK-känsliga K562 celler. Konserverade känslighet för apoptos kan förklara relativt reglerade NK cellen numren i perifert blod på patienterna. Vår kännedom om KAI3 är först rapporterade NK-liknande cellinje etablerade från patienter med svår kronisk aktiv EBV infektion (SCAEBV) innan leukemi eller lymfom. KAI3 celler kommer att bidra till studiet av EBV beständighet i NK cellen miljön och dess relation med hög incidens av leukemi eller lymfom HMB patienter. ( info) |
2/64. Hodgkin och Reed-Sternberg-liknande celler i B-cellers kronisk Lymfatisk leukemi representerar utväxt enda germinal-center B-cell-härledda kloner: potentiella prekursorer av Hodgkin och Reed-Sternberg celler i hodgkins sjukdom. I sällsynta fall av B-cellers kronisk Lymfatisk leukemi (B-CLL) återfinns stora cellerna Morfologiskt liknar eller omöjliga att skilja från Hodgkin/Reed-Sternberg (HRS) celler av hodgkins sjukdom (HD) i en bakgrund av annars typiska B-CLL. Testa dessa HRS-liknande celler för en potentiell klonsläktskap till B-CLL celler genom enstaka celler var micromanipulated från immunostained vävnad avsnitt, och flyttade immunoglobulin gener var amplifierats från tim-liknande celler och B-CLL celler och sekvenserade. De samma variabel (V) gen rearrangements med delad och olika somatiska mutationer påträffades i Tim-liknande och B-CLL celler från 1 patient, som anger härledning av dessa celler från 2 olika medlemmar av en germinal-center B-cell klona. Separat klonurvalet v gene rearrangements var amplifierats från tim-liknande och B-CLL celler från 2 andra patienter, visa samtidiga förekomst av 2 separata expanderat B-cellers kloner. Epstein - Barr virus (EBV) upptäcktes i Tim-liknande celler av dessa 2 senare fallen, som anger klonurvalet expansion av en EBV-har B-cellen i inställningen av B-CLL. det finns bevis som Tim-liknande celler i B-CLL, liksom HRS celler i HD, härrör från germinal-center b celler. Somatiska mutationer har upptäckts i flyttade v generna HRS-liknande celler i samtliga fall, och i 1 EBV-positiva HRS-liknande cellen Klonerna anfaller, somatiska mutationer blev en ursprungligen funktionella v gen omorganisering av den fungerar inte. Vi spekulerar att HRS-liknande cellerna i B-CLL utgör potentiella prekursorer för HRS celler orsakar HD. ( info) |
3/64. Virologiska och molekylär karakterisering av en ny b lymfoida cellinje, etablerade från en aids patient med primära effusion lymfom, hysande både KSHV/HHV8 och EBV virus. Vi rapportera här ett nytt fall av primära effusion lymfom (PEL), förekommer i en fransk homosexuella hiv-1 infekterade hane med en perikardvätska, pleura- och kröslymfknutor tumör spridning, och att skapa från hans pleura-effusion av en ny cellinje, Cra-BCBL, dually infekterade av EBV och KSHV/HHV8. CRA-BCBL celler är av B-cellers ursprung som bedömts som fullgod av deras klonurvalet immunoglobulin tung kedja (växelnav för cyklar) gen omorganisering, identisk med strukturen hos på föräldrarnas tumör. Både cellinje och lymfom cellerna uttryckt antigener som CD38 och CD45 men ingen klassisk B-cellen eller t härstamning begränsat antigener. CRA-BCBL hyser en typ jag EBV virus, uttrycker en svarstid typ II. Uttryck för KSHV/HHV8 ORF72 och ORF75 upptäcktes av RT/PCR. Dessutom kunde KSHV lytic replikering förmå genom behandling av n-BUTYRAT. En likvärdig och hög kopia antal KSHV genomet (20 till 200 exemplar av cellen) identifierades såväl i de primära tumörceller i cellinje. Southern blot (SB) analys av EBV terminal upprepar (TR) visas samma unika bandet cellinje dna och de ursprungliga tumörceller, som överensstämmer med en monoklonala infektion av EBV. SB analysen av KSHV/HHV8 TR visade dessutom samma hybridisering mönster mellan Cra-BCBL och effusion celler, med en gemensam linje på ca 30-40 kb motsvarar de smält termini viral episomes och ett 5 Kb flyttade fragment. Den nya cellinje kännetecknas här skulle kunna vara en användbar modell att studera samspelet mellan två mänskliga herpes virus och deras bidrag till lymphomagenesis. ( info) |
4/64. Epstein - Barr virus-associerade högvärdigt B-cell lymfom av mucosal-associerade lymfoida vävnader i en 9-årig Boy. Vi rapporterar ett ovanligt fall av Epstein - Barr virus (EBV)-associerade mucosal-associerade lymfoida vävnader (MALT) lymfom innefattar lungor, njurar och axillary lymfknutor i ett barn med medfödd hypoadrenalism och panhypopituitarism. Patienten presenteras med en aggressiv klinisk kurs och histologic utveckling. Första tarmbiopsier (1994) av lungcancer och njure visade histologic funktioner av låg kvalitet B-cell MALT lymfom med lymphoepithelial skador inom njurlymfknutor tubules och bronkial epitel. Efterföljande tarmbiopsier (1996, 1997 och 1999) avslöjas gradvis större cytologic atypia, polymorfism och nekros. en ökad mitotiska takt. och en överrepresentation av stora celler, vägledande för utvecklingen från en låg kvalitet till ett högvärdigt MALT lymfom. Immunophenotyping av lungcancer och lymfkörteln organskador visade identiska ytan markör profiler: celler var CD19( ), CD20( ), immunglobulin (Ig) G( ), kappa( ), lambda(-), CD5(-), CD10(-), CD23(-) och IgM(-), och också negativa för T-cell markörer. Immuniseringsämnets analys visat förekomst av immunoglobulin tunga kedjan nydaning och monoclonality av EBV i lungcancer lesion av Southern blot hybridisering och polymeras kedjan re () åtgärd (PCR). De clinicopathologic funktionerna tyder på att dessa skador kan representera ett immunosupression-relaterade kontinuum av låg kvalitet till högvärdigt MALT lymfom. infektion med EBV kan ha bidragit till denna tumör aggressiva kliniska och histologic utveckling. ( info) |
5/64. Epstein - Barr virus (EBV)-inducerad B-cell proliferative oordning efter kemoterapi hos en patient med hemophagocytic lymphohistiocytosis med associerade EBV-induced T-cell spridning. Vi rapporterar om Epstein - Barr virus (EBV)-associerade lymphoproliferative disorder (LPD) som utvecklats efter kemoterapi för hemophagocytic lymphohistiocytosis (HLH), som hade ingen historik över immunodeficiency eller familjär X-linked LPD. HLH, har närvaro av EBV i T-celler bekräftats genom en kombination av in situ hybridisering (ISH) och immunfärgning. Southern blot analys med EBV-TR och immunoglobulin JH provtagningssonder avslöjade oligoclonal spridning av B-celler i varje organ som berörs av onormal B-lymfoida cellerna vid obduktionen. Kombinerade ISH och immunfärgning redovisas närvaro av EBV i Prolifererande B-celler. cytokiner analys under T-cell aktivering i HLH visade markerade behörighetshöjning interferon (IFN) gamma, interleukin (IL) -10 och lösliga IL-2 receptor (sIL-2R) och mild till måttlig ökning av tumör nekros faktor (TNF)-alpha observerades, medan IFN gamma, IL-10 och sIL-2R var förhöjd inledningsvis under HLH-fasen som sedan minskade som LPD utvecklas och B-cell spridning övervägt. Immunsuppressiva kemoterapi för HLH har sedan får latent EBV i B lymfocyter att inducera omvandling och oligoclonal spridning av B-celler, som slutligen resulterar i LPD. Mekanismer för EBV-induced cell spridning är fortfarande oklara, men ändring av olika cytokiner kan vara ansvarig för den. ( info) |
6/64. CD20-positiva vuxna T-cell leukemi. 67-Åriga kvinna var upptagna till våra sjukhus på grund av lymfadenopati och lymfocytos. Monoklonala integrering av HTLV provirus dna upptäcktes och en diagnos av vuxna T-cell leukemi (ATL) gjordes. Flow cytometry framgick att ATL cellerna uttryckt såväl CD20 som T-cell-associerade antigener och uttryck för CD20 mRNA visades också. En ny T-cell delpopulationer uttrycker CD20 molekyler har nyligen upptäckts. Detta är den första rapporten av CD20-positiva ATL, tyder på att HTLV kan infektera och omvandla CD20-positiva T-celler. ( info) |
7/64. Vävnad-specifika uttryck för SV40 i tumörer som är associerade med Li-Fraumeni syndrom. Inaktivering av vilda p53 tumor ljuddämpare funktion är den primära mekanismen om tumör inledande i Li-Fraumeni syndrom (AKU) personer med sett p53 mutationer. Tumörer som härrör från AKU patienter ofta behålla normal p53-allel, vilket tyder på att alternativa mekanismer utöver gen borttagningen måste engageras i utloppsvatten vilda p53 protein. dna-tumör virus, såsom SV40, rikta p53 för inaktivering genom åtgärder av viral oncoproteins. Vi studerade probands från två icke-närstående AKU familjer, vart och ett av dem presenteras med flera maligna tumörer. Patienten 1 utvecklat en vis rhabdomyosarcoma (RMS) och en choroid plexus ca (CPC), medan patienten 2 utvecklat en CPC och därefter presenteras med både en osteosarcoma (OS) och njurlymfknutor cell ca (RCC). Vi utnyttjats dna sequence analysis och immunohistokemi att fastställa p53-genen status i sett och tumörer, samt bevis för SV40 T-antigen oncoprotein uttryck. Varje patient hyste en heterozygous sett p53 mutation vid codons 175 och 273, respektive. I patienten 1 var normala p53-genen förlorade medan mutanta p53-allel sänktes till homozygosity i RMS. Både normal och muterade gener bibehölls i CPC. Patienten 2, var normala och mutanta p53 alleler kvar i både CPC och RCC. Både specifika PCR och immunfärgning upptäcktes SV40 T-antigen i både CPCs och RCC. Utöver kromosomal ändringar, kan Epigenetiska mekanismer störa p53 funktion under tumorigenesis. Vi konstaterade i två AKU patienter, SV40 dna-sekvenser och viral T-antigen uttryck som kunde redovisa inaktivering av det normala p53 proteinet. Inaktivering av p53 eller andra tumor explosionssensorer av virala proteiner kan bidra till tumor bildas i specifika vävnader av genetiskt mottagliga individer. ( info) |
8/64. Framgångsrika allogen stamcellstransplantation från en icke-närstående givare för aggressiva Epstein - Barr virus-associerade klonurvalet T-cell spridning med hemophagocytosis. Vi presenterar här ett fall av aggressiv Epstein - Barr virus (EBV)-associerade klonurvalet T-cell spridning med hemophagocytosis som behandlades framgångsrikt av allogen stamcellstransplantation med hjälp av en icke-närstående givare. En 17-årig kvinna upptogs till sjukhuset med en hög feber och lever dysfunktion. Laboratoriet data inklusive benmärg strävan avslöjade hemophagocytic syndrome med spridning av omogna T-lymfoida celler. Klonurvalet spridningen av EBV-infekterade T-celler bekräftades av Southern blot analys med en terminal-repeat sond från EBV genomet och också genom att visa T-cell-receptorn beta gen nydaning. Intensiva immunochemotherapy bestående av cyclosporin A, vinkristin, etoposide och hög DOS metylprednisolon bekämpa inte sjukdomen och återfall inträffade flera gånger. Därför genomgick patienten under eftergift efter kemoterapi enligt GRISKOTLETT-E regim, allogena benmärg transplantation (BMT) från en HLA-matchade, icke-närstående givare. Givaren urval utfördes med hjälp av japanska föreningen för Marrow Donor program (JMDP). Patienten har legat i gott skick utan återkommer sjukdomen för 18 månader efter BMT. Allogen BMT är behandling av valet för aggressiva EBV-associerade hemophagocytic lymphohistiocytosis även i de fall där en HLA-matchade syskon givaren inte är tillgänglig, särskilt när patienten är eldfasta till intensiv kemoterapi och/eller finns det en klar återkommande sjukdom efter konventionell terapi. ( info) |
9/64. Upprättande och omfattande analys av en ny människa omvandlas follicular lymfom B-cellen linje, Tvid-1. A spontant EBV omvandlas follicular lymfom (FL) cellinje, Tvid-1, fastställdes från lymfkörteln biopsi exemplar av en patient med B-cell som FL, åk 1 i omvandling till hög kvalitet sjukdom. Tvid-1 celler uttryckt lymfoida markörer och utvecklat tumor massorna i immunodeficient möss. Bcl-2, bcl-X(L), Bax och p53 protein uttryck avslöjades av västra analys. Analysen av handelsflödena cytometric bekräftade P-gp uttryck. Cytogenetically, visade Tvid-1 cellinje identiska kromosomal ändringar som första biopsi provexemplaret, bland vilka de mest anmärkningsvärda var t(14;18) typiska för FL och ytterligare avvikelser där kromosomer 1, 8 och 13. Flera färger FISH analys avgränsad alla avvikelser, inklusive en t(1p;8q), en der(8)(8q24::14q32::18q21) och en der(13)(13q32::8q24::14q32::18q21). Den ytterligare FISH undersökningar med hjälp av en locus-specifik prob cocktail som innehåller c-myc, ög och bcl-2 avslöjade fusion av dessa tre lokus på derivat 8 och 13, utöver derivatkontrakt 14 ög/bcl-2 fusion och en extra kopia av c-myc på derivat kromosom 1. Dessa resultat visar ett ytterligare exempel på avregleringen av bcl-2 och c-myc uttryck genom rekombination med en enda ög wtCAB region. De ovanliga molekylära funktionerna i cellinje Tvid-1 gör ett unikt verktyg för studier inriktade på cytogenetiska ombyggnader, uttryck för multidrug motstånd fenotyp och uttryck för anti-apoptotiska proteiner i fl. ( info) |
10/64. Identifiering av sett mutation av PT gen och analys av apoptos motstånd av lymfocyter i en patient med Cowden sjukdom. Mutationer av tumor ljuddämpare gen PT har rapporterats hos patienter med Cowden sjukdom (cd) och i flera maligna tumörer. Vi analyserat sett mutation av PT gen i en patient med cd och identifierat en 4-bp borttagning i exon 8 PT gens. Samma sett mutationen upptäcktes i 3 medlemmar i hennes familj. Den muterade genen förutspåddes att koda en C-terminal trunkeras PT protein. Immunoblotting analys visade att uttrycket nivån på det vilda PT proteinet i patientens lymfocyter sänktes till nästan hälften av nivån av kontroll lymfocyter och den förutsedda trunkerade mutant PT inte kunde identifieras. Eftersom PT är känt att fungera som en negativ regulator av phosphatidylinositol-3-Kinas signalväg som främjar cell överlevnad, patientens lymfocyter har testats för motståndet mot den apoptotiska stimulansen. det visade sig att patientens lymfocyter var mer motståndskraftiga mot apoptos framkallas genom kalcium ionophore än friska kontroll lymfocyter. Dessa resultat visar att de sett mutationen av PT genen och den därav följande bristande heterozygous uttryck kan leda till en ökning av celler, och därigenom dossieren en roll av PT patogenesen vid tumor generation och hyperplasi av lymfoida vävnader i cd överlevnad potential. ( info) |