1/144. St. Gallen do fibrinogénio mim (gama 292 Gly--> Val): evidência para as alterações estruturais que causam a polimerização e o fibrinogenolysis defeituosos. St. Gallen do fibrinogénio eu fui detectado em uma mulher suíça assintomática. Os testes rotineiros da coagulação revelaram uma estadia prolongada do thrombin e do reptilase. Os níveis funcional medidos do fibrinogénio eram consideravelmente mais baixos do que aqueles determinados imunològica. A polimerização dos monómeros da fibrina derivados do fibrinogénio purified foi atrasada na presença do cálcio ou do EDTA. O fibrinopeptide normal A e a liberação de B pelo thrombin foram estabelecidos. Uma degradação anormal de St. Gallen do fibrinogénio eu pelo plasmin fui observado. O fragmento D1 do fibrinogénio normal foi protegido inteiramente de encontro a um proteolysis mais adicional na presença de 10 milímetros de cálcio, visto que o St. Gallen do fibrinogénio mim era parcialmente mais adicional degradado aos fragmentos D2 e D3. Na presença do EDTA de 10 milímetros, a conversão do fragmento variante D1 ao D2 foi acelerada visto que a degradação do fragmento D2 ao D3 foi atrasada em comparação com a degradação dos fragmentos D1 e D2 do fibrinogénio normal. Três locais obrigatórios do cálcio da elevado-afinidade foram encontrados no fibrinogénio normal e variante. A seleção da mutação com análise de SSCP sugeriu uma mutação no exon VIII do gene da gama-corrente. Arranjar em seqüência do ciclo desta parcela do gene revelou uma única substituição baixa de G a T da base 7527, conduzindo à recolocação da glicina da gama 292 pelo valine. A mesma mutação tem sido descrita já para o fibrinogénio baltimore variante I. que a modelagem molecular foi executada de uma parte da gama-corrente que contem o local da mutação, baseada em estruturas de cristal recentemente publicadas do raio X do fragmento humano D do fibrinogénio e de uma peça do C-terminal de 30 kD da gama-corrente. As alterações estruturais significativas devido à substituição da glicina pelo valine na gama 292 foram observadas, por exemplo espalhamento da espinha dorsal da proteína, conduzindo provavelmente a uma acessibilidade modificada dos locais plasmic da segmentação na gama-corrente em 356 Lys e em 302 Lys. Um deslocamento da gama 297 Asp que é envolvida nas interações do fragmento D com o Gly-Pro-Arg-Pro-peptide foi anotado pela modelagem molecular. A última observação é compatível com polimerização atrasada de monómeros da fibrina. ( info) |
2/144. As hemorragia vitreous bilaterais em um infante com baixo fibrinogénio nivelam. Encontrar da hemorragia retinal ou vitreous em um menor de idade da criança 3 anos pode causar a controvérsia significativa no que diz respeito à etiologia, porque levanta a suspeita de ferimento nonaccidental. Os dyscrasias do sangue foram documentados para causar hemorragia retinal e vitreous nos adultos e nas crianças, mas foram relatados raramente para ser a causa de hemorragia retinal nos neonates. Nós relatamos em um paciente com um baixo nível do fibrinogénio do plasma que tenha a hemorragia retinal bilateral que prosigueu à hemorragia vitreous. Esta anomalia subtil da cascata da coagulação de sangue causou a hemorragia retinal e vitreous significativa em uma criança sem factores de risco para o abuso. ( info) |
3/144. hemorragia intracerebral espontânea periódica em um paciente congenital afibrinogenemic: armadilhas diagnósticas e opções terapêuticas. FUNDO: As desordens da coagulação podem causar o sangramento intracerebral que pode ser difícil de detectar desde que a formação aberrante subseqüente do coágulo pode mascarar a deteção adiantada. Esta é uma armadilha importante porque, quando diagnosticados cedo, sangrar nestes pacientes é treatable. DESCRIÇÃO DO CASO: Um paciente com afibrinogenemia congenital apresentou com hemiparesis periódico. A hemorragia intracerebral espontânea foi diagnosticada, apesar de uma varredura inicial do CT do negativo. O diagnóstico, a terapia, e as complicações da terapia são discutidos. CONCLUSÕES: A hemorragia Intracerebral deve fortemente ser suspeitada em todo o paciente com uma desordem da coagulação que apresenta com harmonização de sintomas clínicos. A terapia deve ser instalada imediatamente, antes das investigações adicionais, e deve ser continuada mesmo quando neuroimaging inicial é negativo. ( info) |
4/144. Hypofibrinogenemia associou com uma mutação missense heterozygous gamma153Cys ao arg (Matsumoto IV): in vitro a expressão demonstra o secretion defeituoso do fibrinogénio variante. Nós analisamos genetically um exemplo do hypofibrinogenemia que não mostrasse nenhuma sangramento ou tendência thrombotic. Arranjar em seqüência direto de um segmento reação-amplificado corrente do gene da gama-corrente do polymerase mostrou uma substituição nova do nucleotide. Esta mutação heterozygous codifica Cys (TGT) e Arg (CGT) no resíduo 153. Para examinar a base para a deficiência do fibrinogénio, nós preparamos os vetores da expressão que contêm a codificação gamma153R e gamma153A de DNAs da gama-corrente do mutante para in vitro a expressão em pilhas chinesas do ovário do hamster (CHO). o ensaio da imunoabsorção e a análise Enzima-lig do immunoblot dos meios de cultura e dos lysates da pilha mostraram que as pilhas de CHO transfected com gamma153R ou gamma153A sintetizou a gama-corrente variante, mas não segregaram o fibrinogénio variante no meio de cultura. Metabólico pulso-persiga experiências mostrou que o conjunto do fibrinogénio estêve danificado quando uma ou outra gama-corrente variante foi expressada. Pilhas que expressam o fibrinogénio normal, os intermediários do assem- bly e o fibrinogénio intato foram considerados nos lysates da pilha preparados após (uma incubação curta (3 minutos) ou longa de 1 hora) com (em 35) S-methionine. Nem os intermediários nem o fibrinogénio intato foram considerados com as gama-correntes variantes. Estes dados sugerem que as gama-correntes tenham um papel adiantado importante no conjunto do fibrinogénio. Assim, nossos resultados suportam o modelo para o conjunto do fibrinogénio propor por Huang e outros (268:8919 do Biol Chem de J, 1993), em que a primeira etapa no conjunto é a formação de dímero do alphagamma ou do betagamma, ou por ambos. Este modelo implica que gammaCys153 tem um papel crítico na formação destes intermediários adiantados do conjunto. Nós concluímos que o gamma153Cys--> A substituição de Arg não permite o conjunto e o secretion do fibrinogénio, e esta é manifesta in vivo como uma deficiência do fibrinogénio. Nós designamos esta variação como o fibrinogénio Matsumoto IV. ( info) |
5/144. As mutações Missense no beta gene humano do fibrinogénio causam o afibrinogenemia congenital danificando o secretion do fibrinogénio. O afibrinogenemia congenital é uma desordem recessive autosomal rara caracterizada sangrando isso varia de suave pela ausência severa e completa ou extremamente - baixos níveis de fibrinogénio do plasma e da plaqueta. Embora diversas mutações nos genes do fibrinogénio associados com o dysfibrinogenemia e o hypofibrinogenemia sejam descritas, os defeitos genéticos do afibrinogenemia congenital são pela maior parte desconhecidos, à exceção de um apagamento recentemente relatado de 11 kb do gene da Aalpha-corrente do fibrinogénio. Não obstante, os mecanismos da mutação diferentes do apagamento de um gene do fibrinogénio são prováveis existir porque os pacientes com o afibrinogenemia que não mostra nenhuma alteração bruta dentro do conjunto do fibrinogénio foram relatados. Nós testamos esta hipótese estudando os membros afetados de duas famílias, um italiano e de um iraniano, que não tiveram nenhuma evidência de grandes apagamentos nos genes do fibrinogénio. Arranjar em seqüência dos genes do fibrinogénio nos 2 probands detectou 2 mutações missense homozygous diferentes nos exons 7 e 8 do gene da Bbeta-corrente, conduzindo às substituições Leu353Arg e Gly400Asp do ácido aminado, respectivamente. As experiências transientes do transfection com os plasmídeo que expressam fibrinogens do selvagem-tipo e do mutante demonstraram que a presença de uma ou outra mutação era suficiente para abulir o secretion do fibrinogénio. Estes resultados demonstraram que as mutações missense no gene do fibrinogénio de Bbeta poderiam causar o afibrinogenemia congenital danificando o secretion do fibrinogénio. (sangue. 2000; 95: 1336-1341) ( info) |
6/144. Hypofibrinogenemia em um indivíduo com os 2 que codificam (gamma82 A--> G e Bbeta235 P--> L) e 2 mutações noncoding. Nós investigamos a base molecular do hypofibrinogenemia em um homem com uma estadia de coagulação normal do thrombin. A análise da proteína indicou uma expressão igual do plasma de 2 alelos diferentes de Bbeta, e arranjar em seqüência do ADN confirmou o heterozygosity para um Bbeta235 novo P--> L mutação. A análise da proteína igualmente revelou uma gama da novela (D) corrente, presente em uma relação do 1:2 relativo à gama (A) corrente. A espectrometria maciça indicou uma diminuição de 14 d na gama (D) - massa chain, e arranjar em seqüência do ADN mostrou que esta estêve causada por uma novela gamma82 A--> Substituição de G. ADN que arranja em seqüência o heterozygosity estabelecido para 2 mutações mais adicionais: T--> C no intron 4 do gene de Aalpha e do A--> C no 3' região noncoding do gene de Bbeta. Estudos no man' a filha de s, junto com níveis da expressão do plasma, discontou as mutações de Aalpha e de Bbeta como a causa do baixo fibrinogénio, sugerindo que a mutação gamma82 causasse o hypofibrinogenemia. Isto foi suportado por uma análise de 31 controles normais em quem as mutações de Bbeta foram encontradas a níveis polymorphic, com uma freqüência allelic de 5% para a mutação Bbeta235 e de 42% para o Bbeta 3' mutação untranslated. A mutação gamma82 era, entretanto, original ao propositus. O resíduo gamma82 é ficado situado na hélice tripla que separa os domínios de E e de D, e a embalagem aberrante das hélices pode explicar a concentração diminuída do fibrinogénio. (sangue. 2000; 95: 1709-1713) ( info) |
7/144. Gerência pré-natal e do peripartum do afibrinogenaemia congenital. Nós experimentamos três casos e quatro entregas bem sucedidas com afibrinogenaemia congenital e propor as seguintes directrizes para a gerência pré-natal e do peripartum: (i) o sangramento genital começa geralmente em 5 weeks' a gestação e o aborto espontâneo ocorrem sempre em 6-8 weeks' gestação sem infusão do fibrinogénio; (ii) o nível do fibrinogénio deve ser pelo menos 0.60 g/l e, se possível, mais altamente de 1.0 g/l durante a gravidez; (iii) as quantidades necessárias de aumento do fibrinogénio como a gravidez progridem e o trabalho prematuro ocorre; (iv) o nível do fibrinogénio sob a infusão contínua do fibrinogénio durante o trabalho deve ser pelo menos 1.5 g/l e, se possível, mais altamente de 2.0 g/l para impedir o abruption placental; (v) o puerperium é geralmente uneventful com uma dose reduzida da infusão do fibrinogénio. ( info) |
8/144. Fibrinogénio Bríxia: armazenamento do reticulum e hypofibrinogenemia endoplasmic hepatic por causa de um gamma284 Gly--> Mutação de Arg. O proposita sofreu da cirrose de fígado e a biópsia mostrou o tipo - 1 membrana-limita inclusões da fibra de vidro. Os corpos de inclusão hepatic eram fraca ácido-Schiff periódico diástase-positivo, e no immunoperoxidase que mancha reagido especificamente com os anti-soros do anti-fibrinogénio. As investigações da coagulação revelaram o baixo fibrinogénio funcional e antigénico junto com uma estadia prolongada do thrombin de 37 segundos (17 a 22 os segundos do normal,) sugestivo de um hypodysfibrinogenemia. Arranjar em seqüência do ADN de todos os três genes do fibrinogénio mostrou uma única mutação heterozygous de GGG (Gly)--> CGG (Arg) no codon 284 do gene da gama-corrente. Entretanto, a examinação de correntes purified do fibrinogénio a electroforese dodecyl do gel do sulfato-polyacrylamide do sódio, a cromatografia líquida de capacidade elevada da reverso-fase, cromatografia líquida de capacidade elevada da troca iónica, e pela focagem isoeléctrica, não mostrou nenhuma evidência da corrente da gama do mutante (Br) no fibrinogénio do plasma. Isto que encontra foi substanciado pela espectrometria maciça da ionização electrospray, que mostrou somente uma massa chain normal da gama (e o Bbeta), mas por um grande aumento na parcela de seus isoforms do disialo. Nós especulamos que misfolding da retenção hepatic das causas variantes da proteína e do hypofibrinogenemia subseqüente, e que o defeito funcional (dysfibrinogenemia) resulta do hypersialylation das correntes de outra maneira normais de Bbeta e de gama conseqüentes à cirrose de fígado. Estas conclusões foram suportadas em estudos outros em seis membros da família com hypofibrinogenemia, e essencialmente os tempos de coagulação normais, que eram heterozygous para o gamma284 Gly--> Mutação de Arg. ( info) |
9/144. O truncamento Homozygous da corrente alfa do fibrinogénio A dentro da bobina coiled causa o afibrinogenemia congenital. A base molecular de um afibrinogenemia congenital novo foi determinada. O proposita, único membro afetado em uma família norueguesa consanguínea, sofre de um moderate à desordem severa do sangramento devido à ausência total de todo o fibrinogénio detectável. Os borrões do ponto de plaqueta solubilized revelaram uma pequena quantidade de corrente da gama mas nenhumas alfa de A ou correntes de B beta, visto que nenhuma corrente foi detectada em borrões do ponto do plasma. Arranjar em seqüência do ADN do gene chain alfa de A revelou um C homozygous--> Nucleotides do transversion 557 de T do local de iniciação de transcrição. Esta mudança do nucleotide prevê o alfa 149 Arg da mutação de absurdo A (CGA)--> batente (TGA). O truncamento adiantado da corrente alfa de A parece conduzir ao conjunto ou ao secretion defeituoso do fibrinogénio, provavelmente devido à remoção dos resíduos do anel do bissulfeto do C-terminal que são exigidos crìtica para a formação molécula acorrentada do estábulo 3 de uma meia. (sangue. 2000; 96: 773-775) ( info) |
10/144. Um exemplo do afibrinogenemia congenital: fibrinogénio Hakata, uma mutação de absurdo nova do gene da gama-corrente do fibrinogénio. O afibrinogenemia congenital devido a uma mutação de absurdo homozygous nova do gene da gama-corrente do fibrinogénio, fibrinogénio Hakata, foi encontrado em uma menina japonesa dos anos de idade 18 que recebesse a terapia suplementar do fibrinogénio desde que tinha 4 meses velha. As concentrações do fibrinogénio do plasma do proband foram medidas como menos de 10 mg/dl por um método funcional e menos de 17 mg/dl por um método imunológico. As concentrações do fibrinogénio de sua família estavam na escala de 94-164 mg/dl. O proband e sua família não tiveram nenhum outro sintoma clínico. O ADN de Genomic do proband e de sua família foi isolado das leucócito, e todos os exons de subunits do fibrinogénio e de seus limites do intron/exon foram analisados. Uma mutação genética, um transversion do guanina-à-thymine (G-a-T) na posição do nucleotide de 5860, foi identificada no exon 7 do gene da gama-corrente. Esta mutação mudou o codon para o 231st resíduo da gama-corrente da MORDAÇA (Glu) ao TAG (batente). Nenhuma outra mutação foi observada. Aalpha, Bbeta e as correntes da gama foram observados no plasma dos membros da família heterozygous. Entretanto, somente uma quantidade de traço de corrente de Aalpha e de nenhuma corrente da gama foi detectada no plasma do proband. ( info) |