1/144. St. Gallen I el fibrinógeno (gamma 292 Gly--> Val): evidencia de las alteraciones estructurales que causan la polimerización y el fibrinogenolysis defectuosos. St. Gallen el fibrinógeno me detectaron en una mujer suiza asintomática. Las pruebas rutinarias de la coagulación revelaron un rato prolongado de la trombina y del reptilase. Los niveles funcionalmente medidos el fibrinógeno eran considerablemente más bajos que ésos determinados inmunológico. La polimerización de los monómeros de la fibrina derivó del fibrinógeno purificado fue retrasada en presencia del calcio o del EDTA. El fibrinopéptido normal A y el lanzamiento de B por la trombina fueron establecidos. Una degradación anormal de St. Gallen I el fibrinógeno por la plasmina fue observada. El fragmento D1 del fibrinógeno normal fue protegido completamente contra proteólisis adicional en presencia de 10 milímetros de calcio, mientras que el St. Gallen el fibrinógeno yo era parcialmente más futuro degradado a los fragmentos D2 y D3. En presencia del EDTA de 10 milímetros, la conversión del fragmento variable D1 a D2 fue acelerada mientras que la degradación del fragmento D2 a D3 fue retrasada con respecto a la degradación de los fragmentos D1 y D2 del fibrinógeno normal. Tres puntos de enlace del calcio de la alto-afinidad fueron encontrados en fibrinógeno normal y variable. La investigación de la mutación con análisis de SSCP sugirió una mutación en el exón VIII del gene de la gamma-cadena. La secuencia del ciclo de esta porción del gene reveló una sola substitución baja de G a T de la base 7527, llevando al reemplazo de la glicocola de la gamma 292 por la valina. La misma mutación se ha descrito ya para el fibrinógeno baltimore variable I. que el modelado molecular fue realizado de una parte de la gamma-cadena que contenía el sitio de la mutación, basada en las estructuras cristalinas recientemente publicadas de la radiografía del fragmento humano D el fibrinógeno y de una pieza del C-terminal de 30 kD de la gamma-cadena. Las alteraciones estructurales significativas debido a la substitución de la glicocola por la valina en la gamma 292 fueron observadas, e.g. extensión de la espina dorsal de la proteína, llevando probablemente a una accesibilidad modificada de los sitios plásmicos de la hendidura en la gamma-cadena en 356 Lys y 302 Lys. Un cambio de la gamma 297 ASP que está implicada en interacciones del fragmento D con el Gly-Favorable-Arg-Favorable-péptido fue observado por el modelado molecular. La última observación es compatible con la polimerización retrasada de los monómeros de la fibrina. ( info) |
2/144. Las hemorragias vítreas bilaterales en un niño con fibrinógeno bajo nivelan. El encontrar de la hemorragia retiniana o vítrea en una menor de edad del niño 3 años puede causar controversia significativa con respecto a la etiología, porque levanta la suspicacia de lesión nonaccidental. Los dyscrasias de la sangre se han documentado para causar hemorragias retinianas y vítreas en adultos y niños, pero se han divulgado raramente para ser la causa de hemorragias retinianas en recién nacidos. Divulgamos sobre un paciente con un nivel bajo el fibrinógeno del plasma que tenía hemorragia retiniana bilateral que procedió a la hemorragia vítrea. Esta anormalidad sutil de la cascada de la coagulación de sangre causó hemorragia retiniana y vítrea significativa en un niño sin los factores de riesgo para el abuso. ( info) |
3/144. 3C//DTD HTML 4.01 Transitional//EN"> Yahoo! Babel Fish - Text Translation and Web Page Translation ( info) |
4/144. Hypofibrinogenemia se asoció a una mutación sin sentido heterozigótica gamma153Cys al arg (Matsumoto IV): la expresión in vitro demuestra la secreción defectuosa del fibrinógeno variable. Genético analizábamos un caso del hypofibrinogenemia que no demostró ninguna sangría o tendencia trombótica. La secuencia directa de un segmento reacción-amplificado cadena del gene de la gamma-cadena de la polimerasa demostró una substitución nueva del nucleótido. Esta mutación heterozigótica codifica Cys (TGT) y Arg (CGT) en el residuo 153. Para examinar la base para la deficiencia el fibrinógeno, preparamos los vectores de la expresión que contenían la codificación gamma153R y gamma153A de DNAs de la gamma-cadena del mutante para la expresión in vitro en células chinas del ovario del hámster (CHO). el análisis del inmunosorbente y el análisis Enzima-ligados del immunoblot de los medios de cultivo y de los lysates de la célula demostraron que las células de CHO transfected con gamma153R o gamma153A sintetizó la gamma-cadena variable, pero no secretaron el fibrinógeno variable en el medio de cultivo. Metabólico pulso-persiga los experimentos demostró que el montaje el fibrinógeno fue deteriorado cuando cualquier gamma-cadena variable fue expresada. En células que expresaban el fibrinógeno normal, los intermedios del assem- bly y el fibrinógeno intacto fueron considerados en los lysates de la célula preparados después de la incubación corta (3 minutos) o larga (de 1 hora) con (35) S-metionina. Ni los intermedios ni el fibrinógeno intacto fueron considerados con las gamma-cadenas variables. Estos datos sugieren que las gamma-cadenas tengan un papel temprano importante en montaje el fibrinógeno. Así, nuestros resultados apoyan el modelo para el montaje el fibrinógeno propuesto por Huang y otros (268:8919 del Biol Chem de J, 1993), en que el primer paso en asamblea es la formación de dimeros del alphagamma o del betagamma, o ambos. Este modelo implica que gammaCys153 tiene un papel crítico en la formación de estos intermedios tempranos de la asamblea. Concluimos que el gamma153Cys--> La substitución de Arg no permite el montaje y la secreción el fibrinógeno, y éste es in vivo manifesto como deficiencia el fibrinógeno. Señalamos esta variante como fibrinógeno Matsumoto IV. ( info) |
5/144. Las mutaciones sin sentido en el gene beta humano el fibrinógeno causan afibrinogenemia congénito deteriorando la secreción el fibrinógeno. El afibrinogenemia congénito es un desorden recesivo de un autosoma raro caracterizado sangrando eso varía de suave a la ausencia severa y por completa o extremadamente - los niveles bajos del fibrinógeno del plasma y de la plaqueta. Aunque varias mutaciones en los genes el fibrinógeno asociados a dysfibrinogenemia y a hypofibrinogenemia se hayan descrito, los defectos genéticos del afibrinogenemia congénito son en gran parte desconocidos, a excepción de una canceladura recientemente divulgada de 11 kb del gene de la Aalpha-cadena el fibrinógeno. Sin embargo, los mecanismos de la mutación con excepción de la canceladura de un gene el fibrinógeno son probables existir porque han divulgado los pacientes con el afibrinogenemia que no demostraba ninguna alteración gruesa dentro del racimo el fibrinógeno. Probamos esta hipótesis estudiando a los miembros afectados de dos familias, un italiano y de un iraní, que no tenían ninguna evidencia de canceladuras grandes en los genes el fibrinógeno. La secuencia de los genes el fibrinógeno en los 2 probands detectó 2 diversas mutaciones sin sentido homocigóticas en los exones 7 y 8 del gene de la Bbeta-cadena, llevando a las substituciones Leu353Arg y Gly400Asp del aminoácido, respectivamente. Los experimentos transitorios de la transfección con los plásmidos que expresaban fibrinogens del salvaje-tipo y del mutante demostraron que la presencia de cualquier mutación era suficiente suprimir la secreción el fibrinógeno. Estos resultados demostraron que las mutaciones sin sentido en el gene el fibrinógeno de Bbeta podrían causar afibrinogenemia congénito deteriorando la secreción el fibrinógeno. (sangre. 2000; 95: 1336-1341) ( info) |
6/144. Hypofibrinogenemia en un individuo con 2 que cifran (gamma82 A--> G y Bbeta235 P--> L) y 2 mutaciones noncoding. Investigamos la base molecular del hypofibrinogenemia en un hombre con un rato de coagulación normal de la trombina. El análisis de la proteína indicó la expresión igual del plasma de 2 diversos alelos de Bbeta, y la secuencia de la DNA confirmó el heterocigoto para un nuevo Bbeta235 P--> L mutación. El análisis de la proteína también reveló una gamma de la novela (D) la cadena, presente en un cociente del 1:2 concerniente a la gamma (A) cadena. La espectrometría total indicó una disminución de 14 d de la gamma (D) - masa de cadena, y la secuencia de la DNA demostró que esto fue causada por una novela gamma82 A--> Substitución de G. DNA que ordena el heterocigoto establecido para 2 mutaciones más: T--> C en el intrón 4 del gene de Aalpha y de la A--> C en el 3' región noncoding del gene de Bbeta. Estudios en el man' la hija de s, junto con niveles de la expresión del plasma, descontó las mutaciones de Aalpha y de Bbeta como la causa del fibrinógeno bajo, sugiriendo que la mutación gamma82 causó el hypofibrinogenemia. Esto fue apoyada por el análisis de 31 controles normales en los cuales las mutaciones de Bbeta fueron encontradas en los niveles polimórficos, con una frecuencia alélica de el 5% para la mutación Bbeta235 y el 42% para el Bbeta 3' mutación sin traducir. La mutación gamma82 era, sin embargo, única al propositus. El residuo gamma82 está situado en la hélice triple que separa los dominios de E y de D, y el embalaje aberrante de las hélices puede explicar la concentración disminuida el fibrinógeno. (sangre. 2000; 95: 1709-1713) ( info) |
7/144. Gerencia prenatal y del peripartum del afibrinogenaemia congénito. Experimentamos tres casos y cuatro entregas acertadas con afibrinogenaemia congénito y proponemos las pautas siguientes para la gerencia prenatal y del peripartum: (i) la sangría genital comienza generalmente en 5 weeks' la gestación y el aborto espontáneo ocurre siempre en 6-8 weeks' gestación sin la infusión el fibrinógeno; (ii) el nivel el fibrinógeno debe ser por lo menos 0.60 g/l y, si es posible, más arriba de 1.0 g/l durante el embarazo; (iii) las cantidades necesarias de aumento el fibrinógeno como el embarazo progresan y el trabajo prematuro ocurre; (iv) el nivel el fibrinógeno bajo infusión continua del fibrinógeno durante trabajo debe ser por lo menos 1.5 g/l y, si es posible, más arriba de 2.0 g/l para prevenir la abrupción placentaria; (v) el puerperium es generalmente sin nada especial que destacar con una dosis reducida de la infusión el fibrinógeno. ( info) |
8/144. Fibrinógeno Brescia: almacenaje del retículo y hypofibrinogenemia endoplásmicos hepáticos debido a un gamma284 Gly--> Mutación de Arg. El proposita sufrió de cirrosis del higado y la biopsia demostró que el tipo 1 membrana-limita inclusiones de la fibra de vidrio. Los cuerpos de inclusión hepáticos eran débil ácido-Schiff periódico diástasis-positivo, y en la inmunoperoxidasa la coloración reaccionó específicamente con los antisueros el anti-fibrinógeno. Las investigaciones de la coagulación revelaron el fibrinógeno funcional y antigénico bajo junto con un rato prolongado de la trombina de 37 segundos (17 a 22 los segundos del normal,) de sugestivo de un hypodysfibrinogenemia. La secuencia de la DNA de los tres genes el fibrinógeno demostró una sola mutación heterozigótica de GGG (Gly)--> CGG (Arg) en el codón 284 del gene de la gamma-cadena. Sin embargo, la examinación de las cadenas purificadas el fibrinógeno por electroforesis dodecyl del gel de la sulfato-poliacrilamida del sodio, cromatografía líquida de alto rendimiento de la reverso-fase, cromatografía líquida de alto rendimiento de intercambio iónico, y la concentración isoeléctrica, no pudo demostrar ninguna evidencia de la cadena gamma del mutante (Br) en fibrinógeno del plasma. Esto que encontraba fue verificada por la espectrometría total de la ionización electrospray, que demostró solamente una masa de cadena gamma (y Bbeta) normal, solamente un aumento grande en la porción de sus isoforms del disialo. Especulamos que el misfolding de la retención hepática de las causas variables de la proteína y del hypofibrinogenemia subsecuente, y que el defecto funcional (dysfibrinogenemia) resulta del hypersialylation de Bbeta de otra manera normal y de las cadenas gammas consiguientes a la cirrosis del higado. Estas conclusiones fueron apoyadas por estudios en seis otros miembros de familia con hypofibrinogenemia, y esencialmente los tiempos de coagulación normales, que eran heterozigóticos para el gamma284 Gly--> Mutación de Arg. ( info) |
9/144. El truncamiento homocigótico de la cadena alfa el fibrinógeno A dentro de la bobina en espiral causa afibrinogenemia congénito. La base molecular de un afibrinogenemia congénito nuevo se ha determinado. El proposita, el único miembro afectado en una familia noruega consanguínea, sufre de un moderate al desorden severo de la sangría debido a la ausencia total de cualquier fibrinógeno perceptible. Las manchas blancas /negras del punto de plaquetas solubilizadas revelaron una pequeña cantidad de cadena gamma pero de ninguna alfa de A o cadenas beta de B, mientras que no se detectó ningunas cadenas en manchas blancas /negras del punto del plasma. La secuencia de la DNA del gene de cadena alfa de A reveló una C homocigótica--> Nucleótidos de la transversión 557 de T del sitio de iniciación de transcripción. Este cambio del nucleótido predice la alfa 149 Arg (CGA) de la mutación de absurdo A--> parada (TGA). El truncamiento temprano de la cadena alfa de A aparece dar lugar al montaje o a la secreción defectuoso del fibrinógeno, probablemente debido al retiro de los residuos del anillo del disulfuro del C-terminal que se requieren críticamente para la formación molécula encadenada del establo 3 de una media. (sangre. 2000; 96: 773-775) ( info) |
10/144. Un caso del afibrinogenemia congénito: fibrinógeno Hakata, una mutación de absurdo nueva del gene de la gamma-cadena el fibrinógeno. El afibrinogenemia congénito debido a una mutación de absurdo homocigótica nueva del gene de la gamma-cadena el fibrinógeno, fibrinógeno Hakata, fue encontrado en una muchacha japonesa de 18 años que había recibido terapia suplemental el fibrinógeno desde que ella era 4 meses. Las concentraciones el fibrinógeno del plasma del proband fueron medidas como menos de 10 mg/dl por un método funcional y menos de 17 mg/dl por un método inmunológico. Las concentraciones el fibrinógeno de su familia estaban en el radio de acción de 94-164 mg/dl. El proband y su familia no tenían ninguÌn otro síntoma clínico. La DNA de Genomic del proband y de su familia fue aislada de leucocitos, y todos los exones de las subunidades el fibrinógeno y de sus límites del intrón/del exón eran analizados. Una mutación genética, una transversión del guanina-a-thymine (G-a-T) en la posición del nucleótido de 5860, fue identificada en el exón 7 del gene de la gamma-cadena. Esta mutación cambió el codón para el 231o residuo de la gamma-cadena de la MORDAZA (Glu) a la ETIQUETA (parada). No se observó ninguna otra mutación. Aalpha, Bbeta y las cadenas gammas fueron observados en el plasma de los miembros de familia heterozigóticos. Sin embargo, solamente una cantidad de rastro de cadena de Aalpha y de ninguna cadena gamma fue detectada en el plasma del proband. ( info) |